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- 2025年07月13日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 保存条件：
冷藏
- 保质期：
长期
- 英文名：
Western Stripping buffer
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
250ml
Western一抗二抗去除液(中性)
英文名：Western Stripping buffer规格：250ml
Western一抗二抗去除液，用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5次。
使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。
不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
保存条件：
4℃保存，两个月有效。-20℃保存，一年有效。
注意事项：
使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
使用ECL、BeyoECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
使用说明：
1. 在完成Western化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5分钟。
2. 弃蒸馏水，加入适量的Western一抗二抗去除液(中性)，至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗10分钟。
3. 弃Western一抗二抗去除液(中性)，并吸尽残余液体。加入TBS、TBST或PBS漂洗3-4次，每次在摇床上漂洗3-5分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western的后续操作。
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文献和实验Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
中性突变是指这种突变对生物体的生存既没有好处，也没有海处，就是说，对生物的生殖力和生活力，即适合度没有影响，因而自然选择对他们不起作用。1968年日本人木村资生（M. Kimura）,根据分子生物学的研究，主要是根据核酸、蛋白质中的核苷酸及氨基酸的置换速率，以及这些置换所造成的核酸及蛋白质分子的改变并不影响生物大分子的功能等事实，提出了分子进化中性学说（Natural Theory of Molecular Evolution）。1969年美国人J.L. King和T. H. Jukes
中性植物 neutral plant， day neutral pl－ant， Indetermina e plant 指不论日照时间是长是短，都可形成花芽的植物而言。象豌豆和玉米含有丰富贮藏物质的种子植物，或形成球茎、根茎的植物，一般都属于中性植物。此外，象黄瓜、繁缕、番茄、烟草的许多变种、水晶兰等寄生植物也是这方面的例子。还有浮萍的花芽分化，可由于环境生理条件的不同，尤其是金属离子的存在与否，可变成中性植物，或有光同性诱导的变化。
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