Caspase 4 活性检测试剂盒说明书

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北京百奥莱博专业生产供应Caspase 4 活性检测试剂盒说明书，我公司销售全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：Caspase 4 活性检测试剂盒说明书
品牌：百奥莱博
规格：20次|100次
产地：国产|进口
编号：YT141
英文名：Caspase 4 Activity Assay Kit
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 4酶活性或纯化的caspase 4酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品。

Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 4有时被写作caspase-4或caspase 4，可以和Apaf-1相互作用并参与细胞色素c导致的caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。

本Caspase 4活性检测试剂盒是基于caspase 4可以催化底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 4的活性。pNA在405nm附近有强吸收。

试剂盒中提供了caspase 4催化产生的黄色产物pNA，可以作为定量caspase 4酶活性的标准品。

试剂盒组分：
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-LEVD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl

注意事项：
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405，如有困难可以测定A400。
2. Ac-LEVD-pNA需尽量避免反复冻融，请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)，可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒，请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用，即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。

储存条件：-20℃。

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·Histone H3抗体
编号：YT799
英文名称：anti-Histone H3 antibody
规格：>30次
本抗体是用人工合成的人histone H3氨基端aa 1-20该段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测30次。

本Histone H3抗体识别的是总histone H3(total histone H3)，可检测内源性的Histone H3，未发现和其它组蛋白有交叉反应。

组蛋白histone H2A，H2B，H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体相结合的DNA构成了染色质的基本结构核小体(necliosome)。组蛋白的存在确保了基因组DNA可以被相对致密而有序地堆放在细胞核中。人一个细胞的基因组DNA完全拉成线性的总长度约为1.4米，但染色质的总长度仅为9厘米，而有丝分裂时染色体的总长度仅为0.12毫米。除了核心组蛋白(core histone)histone H2A，H2B，H3和H4外，还有一类linker histone H1和H5。Histone H1可以结合核小体和DNA在核小体中进出的位点，从而使DNA的位置被锁定，有利于在核小体基础上形成更高级的空间结构(参考下图)。组蛋白结合区域的DNA长度为147bp，核小体间的DNA长度大约为50bp。染色质空间结构的松散还是致密很大程度上决定了该区域基因转录水平的高低(参考下图)。



组蛋白是真核生物中呈强碱性的蛋白。组蛋白可以被乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化修饰。这些修饰会改变染色质的空间结构，从而在基因转录调控、染色体装配等过程中起重要作用。通常，histone H2B的Lys5，Lys12和Lys15会发生乙酰化修饰。
Histone H3的Lys9，Lys14，Lys18和Lys23会发生乙酰化修饰。Histone H3的Ser10，Ser28和Thr11都会发生磷酸化修饰。Histone H3的这些磷酸化和有丝分裂或减数分裂过程中的染色质浓缩密切相关。Histone H3 Thr3的磷酸化在很多物种中都非常保守，可以被激酶haspin所催化。Histone H3的Thr3磷酸化发生在有丝分裂早期(prophase)，在有丝分裂的晚期(anaphase)则被去磷酸化。Histone H3和H4是甲基化修饰的主要组蛋白，哺乳动物细胞中histone H3和H4是高度甲基化的。组蛋白可以被单、双或三甲基化(mono-, di-, and tri-methylated)，和基因转录调控和染色体装配密切相关。

Histone H3在其氨基端有一个较长的N terminal tail，在核小体的装配过程中起关键作用。Histone H3是各种histone中修饰程度最高的，在表观遗传(epigenetics)中起重要作用。Histone H3包括H3A1、H3A2和H3A3。人的hitone H3由近15个基因分别单独编码。

产品组份：
Histone H3抗体————30μl
Western一抗稀释液————30ml

抗体参数：

免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人histone H3氨基端aa 1-20该段多肽
宿主：兔
用途：WB,IF
交叉反应性：人
抗体识别位点：Histone H3 N-terminal
Histone H3分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。


Caspase 4 活性检测试剂盒说明书关键词：Caspase 4 活性检测试剂盒,YT141,Caspase 4 Activity Assay Kit

F030205 HRP标记山羊抗小鼠IgG抗体 Goat Anti-Mouse IgG*HRP
F050307 小鼠IgG1抗体 Mouse IgG1
荧光素酶 Luciferase from Bacteria 61970-00-1
HC0229 加样槽(可高压灭菌)
F030607 FITC标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*FITC
BTN90510 包涵体大量纯化试剂盒 Inclusion Body Maxiprep Kit
丁香醛 AMPSO 134-96-3
硫代乙醇酸钠 D-Tryptophanol 367-51-1
ARB13581 兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA检测服务 Rabbit major Histocompatibility complex Ⅲ,mhcⅢ/rlaⅢ ELISA KIT
206752-36-5 Benzamidine 苄眯
BL0941 生物素化羊抗兔IgG抗体
2,4-二羟基-4’-硝基偶氮苯 Pentagastrin 74-39-5
6138-23-4 D-海藻糖
ARB11455 人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)含量测试 Human specifie macrophage arming paetot,smaf ELISA KIT
CYB162021 兔抗马IgG(抗血清) 0.5ml
ARB13766 鸭抗凝血素抗体(APT1/APT2)含量检测 Duck anti-prothrombins antibodies,apt1/apt2 ELISA KIT
PY08-044 营养肉汤 30ml 瓶，用于一般营养不苛求细菌的培养
BL1362 酵母破壁酶溶液
ARB13802 豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)Elisa定量检测 Guinea pig ovalbumin specific igg,ova sigG ELISA KIT
ARB12391 大鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)血清中含量检测 Rat tumor specific growth facter/tumor supplied group of factor,tsgf ELISA KIT
四盐酸精胺 DL3000 DNA Marker 306-67-2
Caspase 4 活性检测试剂盒说明书关键词：Caspase 4 活性检测试剂盒,YT141,Caspase 4 Activity Assay Kit


·YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)
编号：YT373
英文名称：YT Taq DNA Polymerase
规格：200U|1000U
YT Taq DNA Polymerase简称YT Taq酶，是一种兼顾了高保真性和高扩增效率的DNA聚合酶，是我司优先推荐的基因PCR克隆用酶。

YT Taq 酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。同时YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)。另外，YT Taq 酶有5’至3’外切酶活性，但YT Taq 酶没有反转录酶活性。

由于YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性，因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低，出错率为1.6×10-6，略低于Pfu酶的2.6×10e-6
。
YT Taq 酶的DNA扩增效率大大高于Pfu酶，和Taq酶的扩增效率比较接近。因此YT Taq 酶很好地兼顾了扩增效率和扩增的准确性。

用途：高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、T载体克隆等各种常规PCR反应。
1)用YT Taq 酶扩增产生的PCR产物带有3’-dA overhangs，可以用于基于T载体的PCR片断克隆。
2)YT Taq 酶可以扩增长度达5kb的DNA*(代"片")断，最长可以扩增长达10kb的DNA*(代"片")断。通常适合扩增3kb以下的DNA*(代"片")断。

活性定义：One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。

酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10×YT Taq Buffer (with Mg2+)：200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20mM MgSO4, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。

失活或抑制：酚氯*(代"仿")抽提可以使YT Taq 酶失活。

储存条件：-20℃

注意事项：
1）由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用YT Taq 酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2）YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性，在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此YT Taq 酶一定要最后加入，并且要在冰浴上操作。

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