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- 2025年07月15日
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文献和实验Combining ELISPOT and ELISA to Measure Amounts of Cytokines Secreted by a Single Cell
from the other pool were cultured in an uncoated, “blank,” ELISPOT plate. After finishing the incubations, the amount of IFN gamma was measured by ELISA in culture media collected from both plates. The “blank” plate served to measure a total amount of secreted IFN
106/ml培养24ｈ后,收集上清,用ＥＬＩＳＡ法定量测定细胞培养上清中IL2、IFNγ、TNFα，设4个平行孔。 2 结果 2.1 ＡＩＭＶ与完全培养基培养CIK细胞增殖能力的比较 实验表明,ＡＩＭＶ培养细胞较完全培养基培养细胞增殖迟缓。完全培养基增殖高峰期在第12d，增殖平台为第10～12d，最高增殖倍数为638.4倍；而ＡＩＭＶ培养基增殖高峰期在第14d，增殖平台为第14～17d，最高增殖倍数为678.7倍
于检测并计数单个抗体形成细胞。随着单克隆抗体技术的成熟，1983年，Czerkinsky等采用此法检测脾细胞中分泌特异性抗体的细胞数，发现该方法敏感性高简便易行。后来，他们又用这种方法定量分析受到有丝分裂原刺激的外周血中分泌IFN2γ的细胞数。随后，用 ELISPOT法在单细胞水平检测分泌其他细胞因子(如IL-2，IL-4，IL-5，IL-10，TNFα和IL-6) 数量的手段也被建立起来。Nordstrom等用生物素-抗生物素蛋白生物放大法来提高这种方法的敏感性，Herr
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