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冷藏
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长期
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440
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北京百奥莱博科技有限公司
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500ml
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文献和实验免疫荧光(immunofluorescence)是一种常用的光学显微术,即用荧光显微镜来观察细胞中的特定生物分子。免疫荧光依赖于抗体抗原的特异性结合,然后通过直接标记或间接标记方法使用荧光分子指征抗体-抗原结合的位置,以确定目标生物分子在细胞中的位置、丰度和分布情况。 免疫荧光实验流程 1. 固定 固定液种类:有机溶剂(甲醇、乙醇、丙酮等);交联剂(4%PFA、10%中性福尔马林),固定液的选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。但针对磷酸化的抗体,不适合用甲醛,会导致磷酸
,可变混浊,有白色沉淀物,这种沉淀即三聚甲醛,是甲醛的一种聚合形式(加热可重新分解成甲醛)。商品福尔马林用甲醇阻止聚合作用。有时由于溶液不纯或甲醛氧化产生的甲酸成分使溶液呈酸性,酸性的甲醛溶液使标本嗜染酸性、严重时可导致细胞核的嗜酸性染色。因此,在备用的甲醛中宜放入小量的碳酸镁或碳酸钠作为中和剂。如果每100毫升的福尔马林固定液中加入5ml的吡啶,则可调整PH为7。不过,这些方法不能永久保持其PH值;欲望使其长期保持中性,则需以磷酸缓冲液作溶剂进行配制。其配制方法如下: 10%福尔马林
的浓度,再加蒸馏水到95ml即可;或者,可按下列稀释公式配制: 所需酒精浓度 ×配成酒精量=所需原酒精量(ml) 原酒精浓度 配成酒精量-所需原酒精量=应加蒸馏水量(ml) ⑵福尔马林(37%~40%的甲醛水溶液):常用固定液的浓度为5%~10%。如需保持中性,在配制过程中,可在500ml原液(37%~40%的甲醛水溶液)加入约2cm厚碳酸镁,或放几小块大理
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