Anti-IgG kappa, FITC

荧光素FITC标记抗体的方法

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark

FITC荧光二抗？――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光

的价格比常规二抗 只高20%左右，但是Dylight的效价通常是常规荧光二抗的2-4倍左右，因此就最终的性价比，Dylight更胜一筹。举例来说，EarthOx的 FITC标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E031210），100μl和500μl报价分别是￥160和￥640；而相应的EarthOx的 Dylight 488标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E032210），100μl和500μl报价分别是￥200和￥800，但是在具体使用时，比如免疫荧光实验，其推荐稀释比率分别为1:100

FITC，RB200荧光素标记抗体技术

的检测。 　(二)　操作步骤 　　　　将纯化的IgG抗体对PH9～9.5碳酸盐缓冲液透析过夜， 　　　　透析后抗体液移入小烧杯中 　　　　　　　　　　　　　　↓ 　　　　称取适量IFTC，加入二甲亚砜(DMSO)(FITC～1mg/1ml DMSO) 　　　　使终浓度为1mgFITC／1mlDMSO 　　　　FITC／IgG比例:如IgG浓度为1mg／ml，FITC／IgG比例约为50μgFITC／mgIgG； 　　　　如IgG为5～10mg／ml，则比例为25