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长期
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528
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北京百奥莱博科技有限公司
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500ml
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文献和实验脾脏(spleen)位于上腹部左后侧,体积较大,长条形,是体内最大的淋巴器官,也是血流通路中的过滤器官。脾脏内定居着大量的淋巴细胞和其它免疫细胞,是机体发生特异性免疫应答的场所。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同,在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此,可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2 方法 1)无菌条件下取出脾脏,在培养皿中加入适量的分离液,将脾脏放入细胞筛中,置于分离液中进行研磨(具体
要的是预防,因为细胞一旦污染,想救是非常困难的,即便救活,细胞状态也会变差,进而影响实验结果,所以我这边先来讲讲如何预防。生物安全柜是细胞处理的主要场所,而培养箱是细胞生长的主要场所,所以细胞污染通常就发生在这两个地方。那么在使用生物安全柜和培养箱时如何做好预防措施呢? 首先,所有进入安全柜的东西都要尽可能保证无菌。如果实验室条件允许,那直接购买商品化的试剂和耗材是最稳妥的,例如Gibco、Hyclone的试剂,Eppendorf、Corning的耗材,这些大品牌的试剂和耗材一般只要是正品
血,按照1:1比例加入RPMI 1640培养基,将血液进行稀释(以降低血液粘稠度),轻柔混匀,备用。 2) 向无菌离心管内加入适量的单个核细胞分离液,将稀释后的脐带血平铺到分离液液面上方(分离液:稀释脐带血=1:2),保持两液面界面清晰。 3) 800g,室温,离心 20min-30min(注:设置较慢的加速度和减速度,如果有十档,设为第三档)。 4) 离心结束后,吸弃血浆层,小心吸取CBMC层(即白膜层)并转移至15mL离心管中。离心结束后,管内液面从上至下依次为稀释血浆层、CBMC层、分离
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