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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D485
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃，避免反复冻
- 保质期：
长期
- 英文名：
Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors)
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100ml
免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
英文名：Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors)本品WB/IP裂解液，是一种非变性条件下的裂解液，可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100，不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂，裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。
注意事项
1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3）如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测，需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线，如无显著影响，则可继续使用。
4） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验相关专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司
问：请教一个实验问题，PMSF，胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性？要做ELISA，样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂？请大牛指教！答：不会影响酶活性，因为蛋白酶抑制剂，抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类，而是过氧化酶。（不过dtt肯定会破坏HRP）。即使会影响酶活性，实际上做elisa也不影响，因为加样品和加hrp是分开的，不存在。 答：我在研究各种抑制剂对L－氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候，测定L－氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解
裂解物。阳性对照是含有已知的或标准量的待测抗原样品，来源于细菌或杆状病毒超常表达系统或已鉴定的细胞系。它可提示免疫印迹是否成功，并能对抗原的相对分子量进行精确比较；如果阳性对照中抗原的量是已知的，可粗略估计出待测样品中抗原的含量。阴性对照给出的是非免疫抗体与待测样品的背景读数。若有可能，再设置一个不含待测抗原的细胞裂解液对照(例如来源于含无效基因的细胞)更利于解释结果。若比较多个不同细胞样品的抗原含量，则需考虑样品标化问题。例如，若进行有意义的比较，需校正样品的总蛋白量，或校正细胞数。测定样品中蛋白质浓度
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