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- 中国大陆
- KL-D340
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Western Blot Wash Buffer(10×) in TBS
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100ml
10×WB洗涤液(TBS)
英文名：Western Blot Wash Buffer(10×) in TBS规格：100ml
WB洗涤液可以用于WB时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可降低背景，增强信噪比。
取适量10×WB洗涤液，用去离子水10 倍稀释。在一抗或二抗孵育结束后，加入适量的WB洗涤液，使之能盖住杂交膜，在摇床上缓慢摇动洗涤10-15 分钟后，吸尽洗涤液，再加入新的WB洗涤液。共洗涤3 次，每次10-15 分钟。然后进行后续的操作。
如果按照上述洗涤条件,WB的染色结果背景仍然较高，可以适当延长洗涤时间，并增加洗涤次数。通常，延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对WB的结果产生负面影响。
注意事项
1. WB洗涤液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存：RT，有效期12个月。
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文献和实验一、TBS的配制 0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制： Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g NaCl 17.5g 加蒸馏水 1500ml 磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4，再加蒸馏水至2000ml，即可。 如需含1% Triton X-100，则在滴加HCl前先加入20
和靶蛋白 Y 来自细胞裂解液，那么裂解液配方建议选择非变性裂解液，NaCl 浓度＜150 nM，SDS 浓度＜0.2% 洗涤液---去除非特异结合蛋白，顾及互作蛋白间的结合强度优化配方 如果互作蛋白作用较弱，建议选择 PBS 或者 TBS 进行洗涤 通常会加入去垢剂降低背景，比如 0.5-1% NP-40/TritonX-100/CHAPS 如果效果还不佳，还可增加盐离子浓度，比如＜250 nM NaCl，以及加入1-2 nM DTT/β-ME 还可增加洗涤次数，比如 3-5 次 洗脱液---
以前自己总结的Western Blot经验。原先看到版上WB资料泛滥，不想发了。但是后来想想存在电脑里也是浪费，还不如共享一下：） 希望对大家有用！ 1、缓冲液的选择，是用PBS/PBST，还是用TBS/TBST？ （1）PBS/PBST不适合AP系列，TBS/TBST适合AP和HRP体系。 （2）另外,做磷酸化蛋白的WB，PBS不合适。 2、如果用HRP体系，那么不能用叠氮钠做防腐剂。因为叠氮钠会抑制HRP的作用。 3、WB中抗体的选择： 单抗专一性高
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