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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃避光
- 保质期:
一年
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
1Kit
吖啶橙/EB检测试剂盒
本试剂盒主要通过将吖啶橙和EB结合染色的方式检测细胞凋亡情况,主要原理是:吖啶橙能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,与双链DNA结合后发出绿色荧光,溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。经AO和EB双染后,在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:
①正常细胞(normal cells),核染色质被AO着均匀绿色并呈正常结构分布于细胞中央;
②早期凋亡细胞(early apoptotic cells),核染色质被AO着绿色在细胞的一侧呈月牙状或颗粒状;
③晚期凋亡细胞(late apoptotic cells),核染色质被EB染色为橘红色倾斜于细胞内部并呈固缩状或圆珠状;
④坏死细胞(Necrotic cells),表现为细胞体积增大,核染色质被EB着色为橘红色,细胞轮廓模糊,细胞即将瓦解。
本产品AO、EB溶液浓度分别为100µg/ml,所含稳定剂不影响实验效果。
注意事项
1)AO、EB均为诱变剂,可与DNA结合,操作时务必小心谨慎!
2)含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4℃避光,有效期一年。
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文献和实验AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡
细胞的碘化丙锭(propiolium iodide,PI)染色 PI和EB(溴化乙锭)为同类物质,与EB一样,PI嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,PI的荧光强度约为EB染色的1.8倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm。 1.1 小鼠Lewis肺癌细胞(3LL)DNA含量测定方法 (1)从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗; (2)去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块; (3)小碎片移入1.20×38mm注射针,加压
肾毒性。DMSO是毒性比较强的东西,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水以及稀氨水洗涤。最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。吸入:高挥发浓度可能导致头痛,晕眩和镇静。皮肤:能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应。要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液,因其毒性不为人所知,而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤,在一定条件下会将有毒物质代入肌肤。吸收:吸收危险性很低。2.EB
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