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- 信帆生物
- XFH10724
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10
- 供应商：
上海信帆生物科技有限公司
- 检测方法：
elisa
- 应用：
科研实验
- 适应物种：
人，大鼠，小鼠
- 样本：
血清，血浆及相关液体
- 规格：
96T
elisa试剂盒
☆★问:请问试剂盒的标曲应该怎么计算呢？
☆★答:老师，你好！计算的时候，以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， 即为样品的实际浓度。
☆★问:你好，我想咨询一下ELISA试剂盒的加样，怎么样才能确保加样准确呢，加样具体应该怎么加，用什么仪器？
☆★答:老师，你好。我们试剂盒在加样的时候，均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
☆★问:你好，我想了解一下你们试剂盒在洗涤的时候，有什么特别需要注意的地方吗？比如洗涤几次好？
答，老师，你好！我们的试剂盒在操作的时候，洗涤一般是洗涤5次，然后拍干。其他你按照说明书操作即可。
☆★问:使用枪头加样注意事项？
☆★答:如果使用的枪头、加样槽是反复使用的，必须肯定其没有来自酶或阳性的污染。酶作为反应 的催化剂，及其微量也会很明显影响反应。反复使用的枪头、加样槽清洗不当，也会干扰反 应。同样枪头和加样槽不正确清洗，改变加入试剂的 PH 值，反应的结果也会不正常。
☆★问:OD值不正常，原因有哪些？
☆★答:有可能是孵育时间不准确，应该控制孵育时间。洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长
洗涤次数增加，可以洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干。酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm。或者是温度控制不好，控制正确温度。水质问题，使用矿泉水来代替。等等。
☆★问:ELISA实验操作中加样的注意事项？
☆★答:样品稀释液少加，或血清多加，都会引起本底增高。所以我们应该严格按照说明书来操作，如果加入的血清过多，高于规定 的稀释倍数，必将带来阴性高值。另外加样时应将所加物加在 ELISA 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。
☆★问:是否提供代测服务？
☆★答:购买我司ELISA试剂盒，可以提供免费代测服务。上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样的服务，其他地方的老师可以把样本用EP管装好，编好号。放到泡沫箱子中，用干冰和冰袋寄送。我们是收到样本后7个工作日出实验报告。实验报告包括说明书，实验室用的仪器型号，数据，标曲等。
标本要求：
在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参? 照此实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
5.培养细胞：检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂，用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
8.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
Elisa试剂盒操作注意事项
1、实验室的环境要干净，防止空气中的一些细菌或粉尘对实验造成干扰。
2、一般的酶联免疫试剂盒中的酶标抗体是以辣根过氧化物酶（hrp）进行标记的。因此要求样本不能含叠氮钠（nan3），因为nan3是hrp的抑制剂。
3、如果样本是血清，应该充分离心，不得有颗粒。
4、试剂盒应在保质期内使用。不同批次的试剂盒中的溶液不得混用。
5、在进行酶联免疫实验之前，应该将试剂盒放置室温平衡30min以上。
6、稀释溶液时，应按照说明书的要求进行精确稀释。尽量选用去离子水或双蒸水进行稀释。
7、要正确使用移液器，吸取液体要精准，枪头上不得留有气泡。吸取不同的液体时，要注意更换枪头。
8、加样时要悬臂加样，避免枪头和孔内液体接触。
9、建议所有的样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。孵育时需将微孔用封板膜或保鲜膜封好，防止水分的蒸发。且封板膜不得重复使用。
10、底物显色剂为tmb，应避免与皮肤接触。终止液为2m浓硫酸，具有腐蚀性，应避免与皮肤接触。
elisa试剂盒
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文献和实验C5b67+C8 C5b678 + C9 C5b6789n (膜攻击复合体) 细胞裂解 C5b：不稳定，C6和C7的受体 C5b67：与细胞膜紧密联系/稳定复合物/对细胞膜不造成损伤 C8b:C5b67结合 C8a-g:结合到C8b C8g :插入细胞的脂质膜 （1）使复合物稳定附着 （2）诱导C9分子聚合C5b6789n >4:发生溶胞>12:聚C9二. 旁路（替代）激活途径 与经典途径不同，旁路（替代）激活途径是不经过C1、C4、 C2途径
-down模式（即间接法）联合抗人检测抗体进行分析，因此不受影响。相比之下，SARS-CoV-2抗原的免疫分析通常使用夹心法模式，容易受到干扰性抗体的影响。 判定干扰性抗体是否是导致错误结果的原因，可以使用市面上商业化的ELISA试剂盒进行检测，这些试剂盒设计用于鉴别嗜异性抗体、HAMA和RF（通常简称为HAMA-ELISA）。鉴定后，常使用HAMA阻断剂来解决干扰问题。该解决方案的缺点是更多的生物活性成分-抗体-被添加到分析中，这可能会导致新的干扰。一般情况，多数生产商会提供几种不同的HAMA阻断
。另外研究表明，C9是通过C8而同c 5b-8结合的，因C9不能同C5b-7相结合，而其同C5b-8的结合则可被抗C8的抗体所抑制。 图5-10 C8分子的结构（模式图） C8的基因定位较复杂，其中编码α链和β链的基因C8A和C8B定位于人的第1号染色体，而编码γ链的基因C8G则定位于第9号染色体的长臂。目前已对C8β链的cDNA克隆成功，并做了序列分析，发现其与C9具有高度的同源性，而且二者均含有丰富的半胱氨酸的膜嵌入区。C8的α链和β链在遗传
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