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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
elabs
- 检测方法:
Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
- 样本:
Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
- 适应物种:
Human/人
- 规格:
96T
英文名称/English Name:Human C8b (Complement Component 8b) ELISA Kit
货号/Catalog Number:E-EL-H0811
种属/Organism:Human/人
指标名称/Other Names:C8b
检测方法/Method:Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
检测范围/Detection Range:
灵敏度/Sensitivit:
检测样品/Sample Type:Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人C8b抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的C8b会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人C8b抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人C8b抗体与结合在包被抗体上的人C8b结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,C8b浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中C8b的浓度。
标本收集:
血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 如果样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
酶标仪(450nm波长滤光片)高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
关键词:人补体因子8b(C8b)Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒
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文献和实验C5b67+C8 C5b678 + C9 C5b6789n (膜攻击复合体) 细胞裂解 C5b:不稳定,C6和C7的受体 C5b67:与细胞膜紧密联系/稳定复合物/对细胞膜不造成损伤 C8b:C5b67结合 C8a-g:结合到C8b C8g :插入细胞的脂质膜 (1)使复合物稳定附着 (2)诱导C9分子聚合C5b6789n >4:发生溶胞>12:聚C9二. 旁路(替代)激活途径 与经典途径不同,旁路(替代)激活途径是不经过C1、C4、 C2途径
-down模式(即间接法)联合抗人检测抗体进行分析,因此不受影响。相比之下,SARS-CoV-2抗原的免疫分析通常使用夹心法模式,容易受到干扰性抗体的影响。 判定干扰性抗体是否是导致错误结果的原因,可以使用市面上商业化的ELISA试剂盒进行检测,这些试剂盒设计用于鉴别嗜异性抗体、HAMA和RF(通常简称为HAMA-ELISA)。鉴定后,常使用HAMA阻断剂来解决干扰问题。该解决方案的缺点是更多的生物活性成分-抗体-被添加到分析中,这可能会导致新的干扰。一般情况,多数生产商会提供几种不同的HAMA阻断
。另外研究表明,C9是通过C8而同c 5b-8结合的,因C9不能同C5b-7相结合,而其同C5b-8的结合则可被抗C8的抗体所抑制。 图5-10 C8分子的结构(模式图) C8的基因定位较复杂,其中编码α链和β链的基因C8A和C8B定位于人的第1号染色体,而编码γ链的基因C8G则定位于第9号染色体的长臂。目前已对C8β链的cDNA克隆成功,并做了序列分析,发现其与C9具有高度的同源性,而且二者均含有丰富的半胱氨酸的膜嵌入区。C8的α链和β链在遗传
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