Binuclease广谱核酸酶

Binuclease广谱核酸酶

Binuclease广谱核酸酶产品简介：
广谱核酸酶Binuclease是经过蛋白质工程技术改造的源于粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens，又称灵杆菌）的非特异性核酸内切酶。它不含有原核生物表达的细菌内毒素。在功能上，它能够降解各种形式DNA和RNA，无论是单链、双链、线状、环状或超螺旋形式的DNA和RNA，切断磷酸二酯键从而产生5’-磷酸核苷酸或5’-磷酸寡核苷酸。

广谱核酸酶对核酸碱基序列无特异性要求，可在链内任意核苷酸间进行切割，可用于除去生物制品中的核酸。在疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业中，广泛用于去除宿主核酸残留，可使疫苗和蛋白类产品核酸污染达到皮克（picogram, pg）级别。广谱核酸酶也可以作为培养细胞上清和细胞裂解液去粘度的首选酶制剂。

Binuclease广谱核酸酶应用范围：
1、用于除去生物制品中的DNA/RNA
美国FDA对治疗用每剂量的生物制品的核酸含量要求为低于10 pg，国内对此相应的要求为低于100 pg。广谱核酸酶可将核酸水解为3～5 bp的寡聚核苷酸，再经过色谱层析等方法纯化，使生物制品的最终核酸含量符合要求。

2、用于降低细胞破碎后的粘度
广谱核酸酶可以水解核酸，降低细胞溶解产物的粘度，从而提高蛋白质的产量，改善离心分离效果，使之易于过滤（尤其是超滤），增加层析纯化的效率。

3、用于细胞培养上清来源产物的纯化过程
核酸很容易粘附在病毒样颗粒（VLP）、病毒粒子、包涵体等细胞生成颗粒的表面，造成这些颗粒的聚集，使颗粒大小或电荷发生改变，从而影响分离提纯。广谱核酸酶可有效避免核酸的对纯化的影响，从而提高产量。

4、用于生化分析中样品的制备
在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中，用广谱核酸酶处理含有核酸的蛋白样品，可提高分辨率，并提高回收率。

Binuclease广谱核酸酶基本信息
CAS No.：9025-65-4
E.C.：3.1.30.2
来源种属：粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）
货号：GPE0004
酶活性值： 固体酶活性值≥ 20 kU/mg冻干粉；
液体酶活性值≥ 250 U/µL。
比活性值： ≥ 1000 kU/mg蛋白
分 子 量：27.9 kD
产品性状： 固体酶为白色冻干粉；
液体酶为无色透明液体（含甘油的缓冲液）。
纯度：≥ 90%（高纯≥ 95%）（SDS-PAGE）；
蛋白酶：未检出
内毒素：（鲎试剂法）未检出。
最适pH：8.0（工作范围pH 6～10）
最适温度： 37°C（工作范围0～42°C）
辅助因子： 1～10 mM Mg²⁺
微生物指标： 固体酶溶解后如需储藏，建议过滤除菌后置于－20°C保存。
液体酶经0.22 μm条件过滤除菌后，未检出微生物。

运输、储存及稳定性：
固体酶可室温运输。建议储存温度低于4°C。
液体酶宜冷藏运输。建议－20°C保存。
液体酶在－20°C条件下，有效期为1年。打开包装使用后，如果在2～8°C环境下放置超过一周时间，建议过滤除菌，防止微生物污染。固体酶储存有效期为3年，打开包装后及时使用，避免受潮。
贮存缓冲液：20 mM Tris-Cl（pH 8.0），2 mM MgCl₂，20 mM NaCl，50%甘油。
稀释缓冲液：20 mM Tris-Cl（pH 8.0），2 mM MgCl₂，20 mM NaCl。
本品固体冻干粉酶可用上述溶液溶解后保存，或不加甘油直接使用。

活性测定及活性单位定义：
参考Sigma公司的测活方法。
一个酶活性单位（U）定义为：在37°C、pH 8.0的反应条件下，30分钟内可将37 µg的底物DNA（鲑鱼精DNA）消化成为寡核苷酸（相当于使260 nm吸收值变化1.0）的Binuclease核酸酶的量。