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100mL
胰蛋白酶(Trypin)是一种丝氨酸水解酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关,在PH 8.0和37℃时,胰酶的作用能力最强,因此使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。
一般常用胰酶的工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。
产品信息
形态 |
液体 |
规格 |
100mL |
PH |
7.2-7.4 |
溶剂 |
10mM PBS |
胰蛋白酶浓度 |
0.5g/L |
EDTA•2Na |
0.2g/L |
酚红指示剂 |
无 |
储存条件 |
-20℃ |
运输条件 |
冷冻 |
有效期 |
12个月 |
注意事项
1、由于不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样,因此操作人员应根据实际情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2、使用本产品时应注意无菌操作,避免污染;
3、不宜长时间放置于室温环境或4℃长期保存;
4、2℃~8℃中解冻,摇匀后使用,切忌反复冻融,用量较少时建议分装冻存。
5、本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
Procell优势
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文献和实验、封片、镜检。 三、常用抗原修复方法 用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片:1、抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如 TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以 0.01M 枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的 ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂)配制,取该粉剂一包溶于1000ml 的蒸馏水中,混匀,其 pH 值在 6.0 ± 0.1,如因蒸馏水本身造成的 pH 值偏差,请自行调整
的 PBS)离心洗涤 1~2 次; 若悬液中有明显的沉淀块,需用 200~300 目的滤网过滤后再用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)洗涤 1~2 次; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整浓度至 1x107/mL 备用。 六、贴壁细胞的制备 吸除培养基上清液,用含无钙、镁离子的PBS漂洗一次; 以 25 mL 培养基为例,加入 1 mL 消化液(0.1%胰蛋白酶),置室温(25℃)或 37℃ 消化 2~5 min;或者加入 1 mL 的 EDTA
过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃ 保存,保存时间为 1 周。(-20 ℃长期保存) 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中,定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS(2L) NaOH 调 pH 值至 7.4,定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后,分装于 1.5 mL 离心管中,4 ℃ 可保存数周,-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存,1 次溶液可重复
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