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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
20次(A)/20次(B)
酵母化学感受态细胞制备试剂盒
英文名:Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit编号:KL81109
规格:20次(A)/20次(B)
产品简介:
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品,它具有下列特点:
1.一次制备,-80℃保存,多次使用。
2.操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要10分钟。
3.试剂盒含高效转化液,即开即用。
4.得到的感受态细胞的最高转化效率在0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。
5.适用于各种实验用酵母菌株,包括S.cerevisiae、C.albicans、S.pombe、Pichia pastoris 等。也可用于携带有选择性质粒的酵母。
6.得到的感受态细胞可即刻转化各种线性或环状酵母穿梭质粒,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
7.可以用于定点突变(Site-Directed Mutagenesis)、基因破坏(GeneDisruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)、酵母双杂交系统等实验。
使用及效果:
将一个酵母菌落接种到10 mL的YPAD培养基中,30℃摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0,离心弃上清后再用5 mL工作液(5 mL溶液A+0.25 mL溶液B,混匀后即得工作液)洗涤,再用0.2 mL工作液将菌体重悬,然后按每管0.1 mL分装,放-80℃保存。
运输及保存:
常温,有效期一年。
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文献和实验1、毕氏酵母氯化锂转化法(1)试剂1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水稀释)50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用;(2)感受态毕氏酵母的制备接种Pachia pastoris
相关专题 1、毕氏酵母氯化锂转化法 (1)试剂 1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水 稀释) 50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA )-20℃保存
★ PEG is a minimal requirement for the binding of DNA to yeast cell surfaces ★ Li + only has an effect on yeast cell wall instead of the cell membrane Effect of PEG and Li + on yeast
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