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- KALANG
- 中国大陆
- KL287
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
T-fast competent cell
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
10次|20次
T-fast感受态细胞
规格：10次|20次编号：KL287
英文名：T-fast competent cell
本公司生产的T-Fast感受态细胞源于Escherichia coli K12菌株。T-Fast菌株是经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化，使用pUC19质粒检测，转化效率可达1×108cfu/μg DNA。T-Fast感受态细胞中突变的ΔlacZM15基因产物与载体携带的β-半乳糖苷酶基因表达产物实现α互补，加入lacIq基因更严谨的控制Lac启动子的开启，从而极大的降低了蓝白斑筛选中的假阳性率。此外，T-Fast感受态细胞中endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取，且质粒得率要高于其他常用克隆菌株。本菌株具有T1噬菌体抗性（fhuA2）。
每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。
基因型：
F" proA+B+ lacIq ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
产品特点：
快速：菌株生长快速，涂布于琼脂平板后6h可见菌 落； 过夜培养的单克隆于液体LB培养基中培养4h即可用于质粒提取。
高质粒得率：T-fast感受态细胞质粒得率高于DH5α约 20%。
快速转化：适用于AmpR载体的5 min快速转化流程。
阳性率高：携带lacIq基因，可更严谨的控制Lac启动子的开启，从而提高篮板白筛选的阳性率。
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文献和实验3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR产物进行优化，不需把PCR产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆）。不需在PCR扩增产物上加接头，即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法（Topo TA Cloning Kit）Topo TA克隆原理与TA克隆一样，唯一不同的是TA克隆用的是T
本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉（lacZΔΜ15）。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白，可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株，如BL21（DE3）。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时（>7-8 kb），经转化
） 利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR 扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆 系统和Topo TA克隆 系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR 产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。 所以TA克隆 不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR 产物进行优化，不需把PCR 产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确
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