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冷藏
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长期
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大量
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康朗生物
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50mg
14.4KD单条带蛋白Marker
● 储存条件:-20℃保存● 产品简介:
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质,分子量大小为14.4kD,可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。14.4KD单条蛋白Marker 以干粉状态提供。
● 使用说明:1 配制10mg/ml 14.4kD蛋白Marker母液:取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2 按照下表配制Marker溶液
配制量 浓度 14.4KD母液
(10mg/ml) 超纯水 5×DualColor蛋白上样缓冲液
10 μl 0.2 μg/μl 0.2 μl 7.8 μl 2 μl
50 μl 0.2 μg/μl 1 μl 39 μl 10 μl
100 μl 0.2 μg/μl 2 μl 78 μl 20 μl
1 取配制好的溶液彻底混匀后,95℃处理5分钟立即上样电泳,每次上样10μl。
2 电泳结束后,染色,观察结果。
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文献和实验liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达,分子量是14kd,5%的浓缩胶70v,12%,或15%的分离胶110v,跑90min。湿转:100v,90min。封闭用5%的脱脂奶粉,封闭3h(因为背景深,以为封闭久会好些)。一抗1:3000,4度过夜,二抗1:5000,孵育1h,洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深,虽然可以看见目的条带,但还是有一些非特异性的条带出现,不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
标准,比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处
蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker
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