- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL269
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Fast pGM-Simple-T cloning Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
20μl|60μl
pGM-Simple-T Fast克隆试剂盒
英文名：Fast pGM-Simple-T cloning Kit编号：KL269
pGM-Simple-T Fast Vector是基于pGM-T Vector改良的一种高效克隆PCR产物的专用载体，经由克隆质粒在XcmI内切酶酶切后得到的带3’ T突出末端的线性化载体，通过该方法产生的带有3’ T突出末端的线性化载体效率远高于传统酶切加尾法。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3’端添加一个A，可与pGM Simple -T Fast Vector 3’端的T互补连接。此外，pGM-Simple-T Fast Vector突变掉pGM-T Vector的多克隆位点，以方便自行引入酶切位点。
试剂盒中配备了新型的RapiLigation Mix（目录号：RT407）为高效的T4 DNA连接酶反应试剂，其中含有连接增强剂、酶稳定剂，可大大缩短连接时间、提高PCR产物的连接和克隆效率。按不同需要配备了DH5感受态细胞以及对照用超螺旋质粒，方便进行转化。带有插入片段的重组子可根据α互补原理，进行蓝白斑筛选，判断载体中有无外源基因的插入（白色克隆为阳性重组克隆，蓝色的为载体自连的克隆，具体筛选原理参考分子克隆等书籍）。克隆后，可使用通用引物T7、SP6进行鉴定和测序。
产品特点：
高效快速： 5 min快速连接，阳性率近100%。
灵敏广泛：适合低至0.025 pmol浓度片段和长至8 kb片段的高效连接。
无多克隆位点： 载体自身无多克隆位点，方便自行引入酶切位点。
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文献和实验上海##生物技术有限公司开展免费赠送Seamless Cloning kit活动。任何科研用户填写完整以下问卷都有获赠一个单价688元的Seamless Cloning kit的机会。本次活动计划赠送50个Seamless Cloning kit，本次活动赠送的kit为正式产品，非试用装。 Seamless Cloning kit采用与传统方式不同的基因克隆方法，可以将目的基因定点，定向克隆到目的载体，具有简单，快速，高效的特点。可以绕过传统基因克隆技术中没有合适酶切位点等诸多技术难题，顺利
原理】 1.DNA片段回收方法：DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中，通上一定电压进行电泳，不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶，用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3’T突出端的载体，在连接酶作用下，可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点，可用于PCR产物的克隆和测序。
Fast Taq DNA Polymerase都能做到！产品特点：1. 超快速DNA合成(10-15 s/kb)。2. 大幅度提高保真性，约为Taq 酶的3倍，接近Pyrococcus furiosus DNA聚合酶（Pfu）的水平。3. 高退火温度。在比Tm值高3 °C的条件下，引物仍能有效与模板配对结合，有效打开二级结构，避免引物二聚体的形成，提高扩增特异性和效率。4. 能够从含抑制剂较多的模板直接扩增。5. PCR 产物3’末端有一个“A”碱基，可以直接用于T-载体连接克隆
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