- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL483
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1ml
DNA寡核苷酸退火缓冲液(5X)
规格：1ml编号：KL483
英文名：Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)
本品是一种经过我们多次实验证实、可以用于DNA oligo退火的缓冲液。该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA oligo的退火，而且特别适合于较难退火的用于RNAi(也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。用于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列，极易自身形成发夹结构，从而影响两条DNA oligo的正确退火。使用百奥莱博的Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)，可以有效避免DNA oligo自身形成发夹结构，并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
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文献和实验网络 第三节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用 一、DNA探针的应用 虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针，但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同，所不同的是：（1）杂交时需先在高温80～95℃短时处理，使DNA探针及细胞内靶DNA变性，解离成单
碘化物缓冲液： 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA, 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的？我怎么没有提出DNA来，不知道是为什么？用的是NEB手册上写的方法。1. 按上述方法进行噬菌斑扩增，在第一步离心后，将500 µl含噬菌体上清转入一新鲜离心管。2. 加200 µl PEG/NaCl，颠倒混匀，室温放置10 min。3. 离心10 min，弃上清液。4. 短暂离心，小心吸去残余上清。5. 沉淀物彻底重悬于100 µl碘化物缓冲液中
，20μl/每张切片，42℃水浴半小时。 3．杂交10～20μl/每张切片，加盖硅化盖玻片，将切片置于95℃min，使探针及病毒DNA变性，然后迅速置于冰上1min（也有报告用乙醇使之冷却的），然后将切片置于盛有2×SSC湿盒内，42℃过夜（16～18h）。 4．杂交后漂洗 （1）2×SSC液内振动移除盖片。 （2）2×SSc 55℃10min×2。 （3）0.5×SSc 55℃5min×2。 （4）缓冲液II（含0.5%封阻
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