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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Precast Protein Gels, 10%, 12 wells
- 库存:
844
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1盒(10块)
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京现货10%预制胶,12孔优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货10%预制胶,12孔优惠
英文名:Precast Protein Gels, 10%, 12 wells
产地:国产|进口
规格:1盒(10块)
编号:SY0373
品牌:百奥莱博
本品通过pH中性缓冲液制备,丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺配比是29:1,其规格为浓缩胶5%,分离胶10%,胶板尺寸10×8cm,凝胶厚度1 mm,12孔梳齿,单孔最大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液,蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad,天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比,使用预制胶具有以下优点:1)即开即用,不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固,节省了宝贵的时间和精力;2)不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂(丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺:神经毒性和遗传毒性;TEMED:强神经毒;过硫酸铵:可严重损伤呼吸道,眼睛,皮肤);3)大规模生产,胶与胶之间重复性好,质量稳定,不像手工灌胶那样结果差异大。
使用方法
1)剪开包装取出胶,撕去胶板底端胶纸,将预制胶固定在电泳槽中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢(一定要慢,否则会将胶齿拔断或拔歪)拔出,在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡(通过加固前后板,不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙,还可稳定跑胶质量,电泳过程中“V”型卡不可取出),上样后进行电泳,电泳后取出胶板,用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开,将胶取出,弃去塑料板。
2)电泳:使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液(tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%)。推荐使用低压100V,15min换高压150V跑至电泳结束。
3)转膜:使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液(含 20%甲醇或乙醇),操作与实验室原有操作完全相同。
储存条件:4℃,有效期一年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺有毒,对人体有害,请注意适当防护。
3)电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液,试剂纯度不够,反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ,因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸,否则电路不通,无法电泳。
5)拔梳子时最好浸没在电泳缓冲液中拔,一方面由于液体润滑梳子更容易拔,另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好,如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6)在电泳后开板取胶时,用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙,用力搬动,两板即可应声分开,此时两板底部还不能分开,要通过掰开两板取出凝胶。
7)在上样前,使用“V”型卡加固前后板(加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出),使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”(不必卡到底,不掉即可)卡在前后板的上端中间区域,可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露,电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露,可通过两种方式解决本问题:一是内槽加满缓冲液,外槽液面加至距内槽液面3-5mm,从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装,使其没有凸起的平滑面朝外,从而防止漏液。
我公司的北京现货10%预制胶,12孔优惠,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·第一链cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper)
编号:SY0292
英文名称:First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper)
规格:200T
本品基于Reverse Transcriptase ,该酶是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶,热稳定性提高,在50℃下活性最高,且可耐受高达55℃的反应温度,适用于具有二级结构的RNA模板的逆转录,能稳定可靠地合成cDNA。
RNA模板首先用4×gDNA wiper Mix短暂处理,可彻底去除残留的基因组DNA污染,保证后续的定量结果更加可靠,并且可简化qPCR引物设计,无需跨外显子/内含子仔细设计;随后直接加入5×Super Mix II,即可立即进行逆转录。
5×Super Mix II中含有逆转录反应所需的所有组分 (Buffer、dNTP、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo dT primer mix) ,并可同时终止4×gDNA wiper Mix,保证cDNA的完整性。RNA模板的体积最多可加到总体积的60%,非常适合于低浓度RNA模板的逆转录反应。4×gDNA wiper Mix和5×Super Mix II在-20℃不会冻结,使用方便。
该产品适用于两步法RT-qPCR检测,针对qPCR进行特别优化,比例优化的Random primers/Oligo dT primer mix,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始,最大程度保证了qPCR结果的可重复性。逆转录产物兼容SYBR Green和探针法qPCR。
产品组份:
RNase free ddH2O————1 ml×2
4×gDNA wiper Mix————400 μl
5×Super Mix IIa————400 μl
5×Control Mixb————40 μl
a 包含Buffer、dNTP、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo dT primer mix。
注:与First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(SY0291)中的5×Super Mix成分不同,不可以混用。
b 除不含Reverse Transcriptase外,其余成分与5×Super Mix II相同,用于配制对照反应。
质量控制
所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶,RNase残留。
功能检测:以1 pg-1 μg HeLa cell total RNA为模板,测试qRT-PCR性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线,R2>0.990,斜率在-3.20到-3.60之间;在1 μg HeLa cell total RNA中混入100 ng human genomic DNA,经gDNA wiper Mix处理后,进行qRT-PCR,对照反应的Ct值>40。
储存条件:-20℃。
北京现货10%预制胶,12孔优惠关键词:SY0373,Precast Protein Gels, 10%, 12 wells,10%预制胶,12孔
·EDTA抗原修复液(50×)
编号:SY0764
英文名称:Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
规格:100ml
免疫染色实验,细胞或组织往往需要经多聚甲醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联(cross-link),形成醛交联蛋白,导致抗原表位被封闭。因此,需要对固定组织进行抗原修复(antigen retrieval,AR)来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多,主要有热诱导的抗原修复(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶诱导的抗原修复(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步,抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液,从而达到最佳的修复效果。
本品为EDTA抗原修复缓冲液,pH8.0,是一款非常经典且应用广泛的热修复缓冲液之一,适用于大多数的抗原,经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强。本品特别适合用于石蜡切片,也可用于冰冻切片等其他样本。本品为50×浓缩的EDTA抗原修复液,使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。按照每个片子需10ml抗原修复液的量来计算,约可做500个样品。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片,而冰冻切片由于组织比较脆弱,易在修复过程中被破坏掉,因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位,导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复,也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下,可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3)修复过程中一定要使用足量的修复液(1×)来完全浸没组织切片。
4)不同pH的修复液对修复效果的影响很明显,归于传统习惯使用柠檬酸钠修复液,pH6.0(SY0763)比较多。目前很多资料表明绝大多数抗原(抗体),使用高pH值(约8.0或9.0)的修复液能得到更好的染色效果。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京现货10%预制胶,12孔优惠关键词:SY0373,Precast Protein Gels, 10%, 12 wells,10%预制胶,12孔
·S-Tag 多肽
编号:SY0427
英文名称:S-Tag (Pancreatic RNase A derivtive) Peptide
规格:5mg
S-Tag 多肽(S-Tag (Pancreatic RNase A derivtive))是一种合成的多肽,由15个氨基酸构成。在免疫分析实验中,S-Tag Tag多肽与S-Tag融合蛋白竞争性结合anti-S-Tag抗体。用于洗脱S-Tag融合蛋白时,S-Tag多肽的推荐工作浓度是100-400μg/ml。
多肽序列(Amino acid sequence):H-Lys-Glu-Thr-Ala-Ala-Ala-Lys-Phe-Glu-Arg-Gln-His-Met-Asp-Ser-OH
分子式:C73H117N23O25S
分子量:1748.91
外观:白色粉末
纯度:>99%
溶解性:溶于水或1%醋酸
储存条件:-20℃,有效期1年
·4×Tris-HCl浓缩胶缓冲液,pH6.8
编号:SY0357
英文名称:S-Tag (Pancreatic RNase A derivtive) Peptide
规格:250ml
4×Tris-HCl浓缩胶缓冲液中含有0.5 M Tris base, pH为6.8,25 ℃。可用于SDS-PAGE或native PAGE上层胶的配制。本产品不含SDS,如配制SDS-PAGE,需另外添加10%SDS(SY0352),或购买4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液(SY0356)。
Tris英文名称:Tris base;2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
分子式:C4H11NO3
分子量:121.14。
储存条件:室温。
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