低分子量蛋白Marker II(14.4～116KD)报价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

低分子量蛋白Marker II(14.4～116KD)报价的品牌：百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多低分子量蛋白Marker II(14.4～116KD)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：低分子量蛋白Marker II(14.4～116KD)报价
英文名：Low Molecμlar Weight Protein Marker II
品牌：百奥莱博
规格：20T(100μl)
产地：国产|进口
本产品包含7种已知分子量的标准蛋白质组成，分子量范围为14.4kD-116kD，可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本成品由于含有SDS，不适于非变性胶蛋白电泳(Native PAGE)。



使用说明：
1、第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用。
2、-20℃取一管样品，彻底融化，95℃处理5分钟后立即上样。
注：
a.一次热处理后，未用尽样品-20℃保存；下次使用时只要室温完全融化混匀后即可上样，可以不用再加热处理。然而，如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿，可在Marker中加入终浓度为50mM的DTT，95℃处理5分钟后再上样。
b.上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
3、电泳结束后，染色，观察结果。
注：使用银染时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，可以适当降低Marker上样量。

储存条件：-20℃。

我公司的低分子量蛋白Marker II(14.4～116KD)报价，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·14.4KD蛋白Marker
编号：RFT039
规格：50mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质，分子量大小为14.4kD，可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。14.4KD单条蛋白Marker

以干粉状态提供。

使用方法：
1、配制10mg/ml 14.4kD蛋白Marker母液：取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液。

 

 

配制量	浓度	14.4KD母液(10mg/ml)	超纯水	5×DualColor蛋白上样缓冲液
10μl	0.2μg/μl	0.2μl	7.8μl	2μl
50μl	0.2μg/μl	1μ l	39μl	10μl
100μl	0.2μg/μl	2μl	78μl	20μl

3、取配制好的溶液彻底混匀后，95℃处理5分钟立即上样电泳，每次上样10μl。
4、电泳结束后，染色，观察结果。

储存条件：-20℃。


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·100bp plus DNA ladder(100～5000bp)
编号：RFT002
规格：100T(2×250μl)
本产品是由14条带状双链DNA组成即用型DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。已含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。条带包括100，200，300，400，500，600，700，800，900，1000，1500，2000，3000，5000bp，其中500bp条带为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度8-10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

·通用型PCR试剂盒(含模版和引物)
编号：RFT164
规格：20次
本试剂盒包含完成PCR反应所需全部试剂，可进行PCR实验的教学和科研。其中模板为质粒DNA；引物为根据质粒DNA序列设计的上、下游引物；2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。使用本试剂盒进行PCR反应后，PCR产物大小应为2000bp。

试剂盒组成：

组成	浓度	体积
模板	10 ng/μl	30μl
上游引物(2000 FW)	10μM	30μl
下游引物(2000 RV)	10μM	30μl
2×Taq PCR MasterMix(含染料)	-	2×500μl
去离子水	-	1 ml

操作步骤：
1、冰浴中彻底融化模板，引物和2×Taq PCR MasterMix，混匀后快甩离心将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

	50μl反应体系
上游引物(2000FW) 10μM	1μl
下游引物(2000RV) 10μM	1μl
模板	1μl
2×Taq PCR MasterMix	25μl
水	22μl

3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	30 sec	30
退火	54℃	30 sec
延伸	72℃	2 min
最后延伸	72℃	5 min	1

6、反应完成后，取5ml反应液，1％琼脂糖凝胶电泳，观察条带情况。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·RIPA裂解液(强)
编号：RFT156
英文名称：RIPA Lysis Buffer
规格：100ml
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。RIPA裂解液(强)的主要成分为50mMTris (pH 7.4)，150mMNaCl，1% Triton X-100，1% sodiu*(代"m") deoxycholate，0.1% SDS，以及sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

使用方法：
对于培养细胞样品：
1、融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2.1、 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2、对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3、充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

对于组织样品：
1、把组织剪切成细小的碎片。
2、融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3、按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4、用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5、充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈涡旋使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

注意事项：
1、为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2、需自备PMSF。
3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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