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- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
HA-Tag
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 适应物种:
All
- 保质期:
二年
- 目录编号:
SY0654
- 级别:
单克隆
- 库存:
819
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
小鼠
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
HA-Tag
- 抗体英文名:
HRP-conjugated HA-Tag, Mouse mAb
- 抗体名:
HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆单克隆抗体
- 规格:
20μl(>50次)
| 货号 | 规格 | 产品价格 |
|---|---|---|
| SY0654-FVL | - | ¥200 - 1800 |
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体 一抗,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体 一抗
编号:SY0654
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:HRP-conjugated HA-Tag, Mouse mAb
本品为HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体,HRP标记小鼠抗HA标签单克隆抗体。推荐稀释比例:WB(1:1000~10000)。
人流感病毒血凝素(Human influenza hemagglutinin, HA)是决定人病毒传染性的一类表面糖蛋白。HA标签(HA-Tag)来源于HA分子对应的98-106位氨基酸(YPYDVPDYA ),广泛用作表达载体的通用表位标签。许多融合蛋白经基因工程重组后表达HA tag,且融合蛋白本身的生物活性和体内分布并不会受影响。 其他常用的标签还包括myc、Flag、His、GST等,标签的使用简化了蛋白的检测,分离和纯化。
本抗体特异性识别HA Tag,不仅利于检测带HA Tag的融合蛋白的表达量,另外还利于后续对融合蛋白的分离纯化。
产品类型(Product Type):Mouse ascites monoclonal antibody (Mouse mAb)
反应性:All
宿主:Mouse
应用:WB
缓冲液:1 mg/ml in Phosphate buffered saline (PBS) with 0.05% sodium azide, pH 7.2
纯化:亲和纯化; Purity:>95%(SDS-PAGE)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体 一抗极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
ARB14032 植物维生素B6(VB6)尿液中含量检测 Plant vitamin b6,vb6 ELISA KIT
L-赖氨酸 Indole-3-carboxaldehyde 56-87-1
PY01-008 牛肉粉 250克
CBZ-D-丙氨酸 Decyltrimethylammonium bromide 26607-51-2
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1-甲基-2-吡咯烷酮 Ribonulease H 872-50-4
HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体 一抗关键词:小鼠抗HA-Tag,HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体,HA-Tag抗体,SY0654
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HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体 一抗关键词:小鼠抗HA-Tag,HRP标记小鼠抗HA-Tag单克隆抗体,HA-Tag抗体,SY0654
·12ml重力层析空柱
编号:SY0407
英文名称:Gravity Chromatography Columns
规格:1套
百奥莱博提供的重力层析空柱,适用于多种亲和层析介质的装填,以便于后续相应蛋白的纯化。本品为12ml 重力层析空柱,总装填体积12ml。
储存条件:室温
·细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒
编号:SY0326
英文名称:Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
规格:50T
细胞核蛋白、细胞浆蛋白在细胞研究和蛋白质组学中具有重要意义,因此在体外研究中需要将其从细胞或组织中分离。本试剂盒提供了一种较为简单方便,高效的蛋白抽提方法,其原理是:通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B,在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀,然后破坏细胞膜,释放出细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂C抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒1次可对2×106个细胞和30-50mg组织样品进行抽提,按照该使用量,SY0326可抽提50个样品。
产品组份:
胞浆蛋白抽提试剂A————10ml
胞浆蛋白抽提试剂B————0.5ml
胞核蛋白抽提试剂————2.5ml
储存条件:-20℃,有效期一年。
使用方法
将试剂盒各组分溶解后立即放置在冰上,混匀。取适量的胞浆蛋白抽提试剂A(以下统称:试剂A)和胞核蛋白抽提试剂(以下统称:试剂C)备用,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
1 细胞样品蛋白的抽提
1)细胞处理
对于贴壁细胞:PBS清洗细胞1次,EDTA溶液消化细胞或用细胞刮子刮下细胞,并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞,尽量吸尽上清,留下细胞沉淀备用。
【注】:尽量避免用胰酶消化细胞,以免胰酶降解抽提的目的蛋白。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,PBS清洗细胞1次,收集细胞,尽量吸尽上清,留细胞沉淀备用。
2) 每20µl细胞沉淀加入200µl含PMSF的试剂A。
【注】:对于2×106个Hela细胞,其细胞沉淀的体积大约为20µl或40mg。
3) 最高速剧烈涡旋5s,完全悬浮分散细胞沉淀。
【注】:如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开,可以适当延长旋涡震荡的时间。
4) 冰浴10-15min。
5) 加入胞浆蛋白抽提试剂B(以下统称:试剂B) 10µl。最高速剧烈涡旋5s,冰浴1min。
6) 最高速剧涡旋5s,4℃12,000-16,000g离心5min。
7) 立即吸取上清至一预冷的塑料管中,上清即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用,也可以冻存备用。
【注】:此步千万不要触及沉淀,可以在沉淀上方保留极小体积的上清,以免吸到沉淀。
8) 对于沉淀,完全吸尽残余上清,加入50µl含PMSF的试剂C。
【注】:此步需完全吸尽上清,否则会带来细胞浆蛋白的污染。
9) 最高速剧烈涡旋15-30s,把沉淀完全悬浮并分散开。然后放回冰浴中,每隔1-2min再高速剧烈涡旋15-30s,共30min。10)4℃ 12,000-16,000g离心10min。
11)立即吸取上清至一预冷的塑料管中,即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用,也可以-70℃冻存备用。
2 组织样品的抽提
1) 将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B,并加入PMSF至最终浓度为1mM,混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60mg组织加入200µl组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液,并在玻璃匀浆器内充分匀浆。
【注】:匀浆需在冰浴或4℃进行。
2) 匀浆后将匀浆液转移至塑料离心管内,冰浴放置15min。
3) 4℃ 1,500g离心5min。把上清转移至一预冷的塑料管中,上清含部分细胞浆蛋白。
【注】:吸上清时千万不要触及沉淀。
4) 对于上述收集得到的沉淀,已经充分匀浆,但很多细胞仍没有破碎。接下来请参照【细胞样品蛋白抽提】的步骤2)开始操作,即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作,即可得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤【组织样品抽提】中步骤3)抽提得到的细胞浆蛋白合并备用。
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文献和实验的话就只能现试试了。 国内好像有公司卖你所需要的抗体,可以检索下查查看! baisuilan 只要不是直接标记一抗,利用二抗带荧光或者酶,那就可以。 免疫荧光和免疫组化差不多,二抗带的标记不一样而已。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
superman211 拟通过WB进行AP-1的相关研究,在选择一抗时遇到如下困惑,望了解的战友予以解答。关于AP-1的出c-jun的一抗有多种,其中主要分为磷酸化一抗、非磷酸化一抗两大类。每一大类又包含若干,不知如何选择,它们之间有何区别?实验目的为研究某细胞AP-1的表达情况,及其蛋白磷酸化和DNA结合活性等。 superman211 自顶,望解答,谢谢! ziyunfei ampk细胞
BLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。 4.一抗宿主物种的选择 一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫
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