Caspase 8检测试剂盒-Caspase 8 Detec

产品及特点：

Caspase（Cysteine-requiring Aspartate Protease）家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。Caspase 8（FLICE；MACH；Mch5）通常以酶原的形式存在，在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase 8被认为是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个Caspase，在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中caspase 8被激活，形成一个由p18和p10组成的二聚体，进一步激活下游的Caspase 4，Caspase 6，Caspase 9和Caspase 10。本产品是基于底物Ac-IETDpNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Asp p-nitroanilide)的Caspase 8分光光度法检测试剂盒，可用于检测细胞或组织裂解液中Caspase 8活性或纯化的Caspase 8活性。原理如下：

Caspase 8检测试剂盒-Caspase 8 Detection Kit本产品具有下列特点：

1. 即开即用，不需要花时间准备各种成分，操作简便、快捷、安全，灵敏度高。

2. 适用于培养细胞、新鲜组织等样品的Caspase 8检测。

3.　某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖Caspase 8的机制，此时建议检测其他凋亡信号通路。

4. 与各类型分光光度计和酶标仪兼容，用酶标仪检测或容量不超过100 μL的分光光度检测杯检测时，足够可以检测50个样品。

Caspase 8检测试剂盒-Caspase 8 Detection Kit使用及效果

裂解样品：

1. 细胞样品 收集3-5×106个细胞，向细胞中加入150-200 μL预冷的溶液A（裂解液，每50 μL溶液A提前加入0.5 μL溶液D），冰上静置20-60 min，期间振荡3-4次。4℃，10000 rpm离心1分钟。转移上清至新离心管，取少量上清测定蛋白浓度（Bradford法）。

2. 组织样品 取50-100 mg组织样品，剪碎至3mm×3mm大小，加入150-200μL预冷的溶液A（每50 μL溶液A提前加入0.5 μL溶液D），匀浆器匀浆。匀浆液转移至预冷的离心管中，4℃，1000rpm离心5分钟。转移上清至新离心管，取少量上清测定蛋白浓度（Bradford法）。

Caspase 8检测

取50 μL 含100-200 μg蛋白的细胞或组织裂解液上清，体积不足50 μL的，用10mM PBS（pH7.2~pH7.6）补足体积至50 μL。加50 μL溶液B（每50 μL溶液B提前加入0.5 μL溶液D）。加入5 μL溶液C，37℃避光孵育4小时。酶标仪或分光光度计405nm测定吸光值。通过计算OD诱导剂/OD阴性对照的数值来确定凋亡诱导剂组Caspase 6的活化程度。Solution II, 250ml
Solution III, 250ml
Neutralization Buffer, 250ml
Buffer SE, 250ml
Buffer T1, 250ml
Buffer T2, 250ml
Buffer T3, 250ml
Buffer HB, 250ml
DNA Wash Buffer Concentrate, 100 ml
DNA Wash Buffer Concentrate, 500ml
ETR Reagent, 100ml
MGC Binding Buffer Concentrate, 20ml
SPM Wash Buffer Concentrate, 40 ml
Buffer GBT, 100 ml
Endotoxin-Free Elution Buffer-100
TRK Lysis Buffer , 100ml
QVL Lysis Buffer , 100ml
Buffer ERL, 250ml
Buffer YRL, 100 ml
Buffer BRL, 100 ml
Buffer RB, 100ml
Buffer RPL, 100ml
Buffer RFL, 100ml
Buffer SP, 60ml
RNA Wash Buffer I, 100ml
RNA Wash Buffer II, 100ml
DEPC-treated Water, 100ml
Linear Acrylamide, 10ml