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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,4℃保存
- 保质期:
半年
- 英文名:
Apoptosis Detection Kit
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
20次/50次
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳 定等方面起着十分重要的作用。在细胞凋亡过程中,细胞内膜的磷酯酰丝氨酸外翻 到细胞外膜,而Annexin V(膜联蛋白V)对其有天然的高亲和能力,故可以用荧光 素APC标记的Annexin V作为荧光探针来检测细胞凋亡。本产品即是基于Annexin V-APC的凋亡细胞检测试剂盒。
本产品具有下列特点:
1. 即开即用,不需要专门花时间准备各种成分。
2. Annexin V-APC红色荧光激发波长633nm,最大发射波长660nm。流式细胞仪 检测时,Annexin V-APC的红色荧光建议使用FL4通道检测。
3. 本产品和流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测兼容。
4. 本产品适用于培养细胞(悬浮或贴壁),不适用于组织样品。
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC)使用及效果
2000rpm离心5分钟,收集悬浮细胞;胰酶消化液(无EDTA)消化收集贴壁细 胞。PBS洗涤细胞,2000rpm离心5分钟,收集1~5×105 细胞。取500 μL溶液A悬 浮细胞,加入5 μL溶液B,混匀。室温避光反应5-15分钟。一小时内荧光显微镜下观 察或流式细胞仪检测。
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(propidine iodide
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