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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
BCIP/NBT Chromogenic Kit
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
100 mL
NBT即四唑淡蓝(Nitro-Blue-Tetrazolium),为深蓝色无定形微溶物质。 BCIP即5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐(5-bromo-4-chloro-3-inodlyl-phosphate)。 BCIP/NBT是碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AP)的显色底物,经免疫反应固 定的碱性磷酸酸酶可催化BCIP/NBT产生化学呈色反应,在蛋白转印膜阳性蛋白条 带处原位形成蓝紫色的化合物沉淀,据此颜色反应来鉴定碱性磷酸酶。
BCIP/NBT显色试剂盒使用及效果
用10×AP反应液,25×BCIP,25×NBT和自备超纯水新鲜配制NBT-BCIP显 色液(各成分终浓度均为1×),按每cm2 印迹膜或组织切片需要0.1 mL NBT-BCIP 显色液的比例将足够显色液跟印迹膜或组织切片室温孵育,直到条带显现(一般需要 5-30分钟,具体随靶蛋白浓度不同而不同),将印迹膜或组织切片转入水中即可终止 反应。
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文献和实验) 曝光或是图像设备采集。由于其同样具有持续的发光过程,因此也可以进行多次曝光。在尼龙膜上使用CSPD或CDP-Star底物的杂交,还可进行探针的拨离和重探。 NBT/BCIP 使用类似NBT/BCIP显色底物的好处就在于,检测的过程中不需要X胶片,既可以使用尼龙膜也可以是使用硝化纤维素膜。然而,如果想要获得高灵敏度的检测结果,可能就需要较长的时间了(几个小时)。这种方法也有其不足之处:首先这种方法只能一次性获得信号
mM TrisCl 6.057g Chromogenic solution 33ulNBT solution 33ulBCIP solution 10ml alkaline phosphatese buffer NBT solution:0.1g NBT in 10ml 70% N,N-dimethylformamide BCIP solution:0.5g BCIP in 10ml N,N-dimethylformamide Alkaline Phosphatese buffer 1L
DETECTION OF ß-GALACTOSIDASE AND ALKALINE PHOSPHATASE ACTIVITIES IN TISSUE
immediately before using. Stocks X-Phos (100X):10mg/ml 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate (also referred to as BCIP) in H20. Store in the dark as aliquots at -200 C. Can be frozen and thawed several times. NBT (50X):50 mg/ml nitro
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