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- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY140409-20
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Zero-background Blunt-end Cloning Kit
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
20次
本产品是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统，可以高效克隆平末端 PCR 产 物和任何具有平末端的DNA 片段。试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载 体克必隆B载体（组成型）。
本产品具有下列特点：
1. 采用自杀基因原理，无需蓝白斑筛选，零背景。
2. 该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。
3. 阳性选择载体和插入片段连接仅需5分钟即可获得超过95%的阳性重组克隆。
4. 由具有校正活性的聚合酶(如：Pfu DNA聚合酶，KOD DNA聚合酶)扩增的平末 端 PCR 产物可直接连入克隆载体。
5. 连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
6. 为方便酶切作图和插入片段基因操作，本克隆载体的多克隆位点两侧各包含一 个BglII识别序列。此外，该载体含有T7启动子，可用于体内或体外转录、插入 片段测序等研究。
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）使用及效果
详细使用步骤请参见产品使用手册。
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文献和实验3 条独立序列。 --- 一、第一步永远不是打开设计工具，而是明确编辑目的 不同目的对应的靶区域完全不同，这一步错了后面全错。 做移码敲除（KO） 靶点要在所有主要转录本共有的组成型外显子上，位置尽量靠 5' 端； 避开最后一个外显子（NMD 逃逸风险）； 切割位点要落在功能结构域的上游，越早越好； 参考转录本建议用 MANE Select 或 CCDS，而不是随意选一条 RefSeq。 做大片段删除 / 整外显子删除 在同一外显子或相邻外显子上设计一对 gRNA； 两个切割位点之间建议间隔
摘 要： RACE是一种快速克隆cDNA末端的方法，目前, 该方法被广泛应用于未知碱基序列基因的克隆，尤其是SMART RACE技术更为人们所青睐。本文总结了我们实验室用SMART RACE技术克隆基因的一些心得体会，希望对用RACE方法克隆基因的同行有些帮助。 关键词： RACE; RNA提取; 兼并引物 中图分类号 :Ｑ75 文献标识码 :Ａ Some Suggestions on Gene Cloning by RACE-PCR Abstacts：RACE
很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择，现系统地解答一下，供新手借鉴。
克隆试剂盒 方便地将 PCR 扩增 DNA 直接克隆到 pETBlue 载体中 除了含有未切割质粒的 pETBlue TM 系统， Novagen 还提供可立即插入 PCR 产物的 pETBlue 载体。已有两种试剂盒： AccepTor TM 载体试剂盒能够插入带单个 3' -dA 突出的 DNA ，如非校对 DNA 聚合酶 ( 如 Taq DNA 聚合酶 ) 的扩增产物；而 perfectly Blunt a 克隆试剂盒设计用于克隆任何末端形式的插入片段。 在 pETBlue
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