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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
SMD1168H Yeast Strain
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1 mL
SMD1168H是毕赤酵母菌株,属于真核细 胞。具有氨苄和卡纳抗性。质粒转化条件 为电转化,应用于蛋白表达,诱导方法为 甲醇诱导。适宜的生长温度是28-30度, 一般使用30度培养,温度超过32度可能导 致细胞的死亡。本菌株被推荐用来表达含 有Zeocin抗性的酵母表达载体重组质粒, 例如pPICZ A, B, C系列的载体。本菌株基 因组中的Pep4基因发生突变,造成蛋白水 解酶A活性的丧失,可以保护表达产物免受 降解,促进表达量的提高
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文献和实验和Pichia 2个种属,共有30余种[8],其中尤以P.pastoris发展最快,研究最清楚。目前,用于外源基因表达的P.pastoris菌株为Invitrogen公司构建,主要有:Y11430,MG1003,GS115,KM71和SMD1168,其中Y11430为野生型,其余皆为组氨酸突变型,GS115有完整的aox1基因,在甲醇培养基上表型为Mut+,当用重组表达载体转化后,由于表达载体线化所用酶不同,其转化子表型可能是Mut+或Muts,可通过MD和MM培养基进行表型的鉴定;KM71的aox
醇的培养基上生长。最近,人们新推出了一类蛋白酶缺失型菌株,如SMD1163(his4 pep4 prb1)、SMD1165(his4 prb1)和SMD1168(his4 pep4),解决了降解所造成的表达产物不均一性问题。但是,蛋白酶缺失型菌株生长缓慢,导致外源蛋白质产量上不去。 巴斯德毕赤酵母包括自我复制型游离载体和整合型载体,前者极不稳定,因此一般采用整合型载体。整合型载体含有一个启动子、相应的转录终止密码、筛选标记、抗生素抗性基因、在细菌中进行拷贝增殖所必需的序列以及3 ‘AOX1非编码区序列P
labeled with a fluorophore were allowed to bind to the antigen. We incubated samples with antibodies for about 1 h to complete the binding reaction. Then the non-bound labeled antibodies were removed, a buffer was added, and fluorescence signal
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