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- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY12-216
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-80℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
SMD1163 Yeast Strain
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
1 mL
SMD1163是毕赤酵母菌株，属于真核细 胞。具有氨苄和卡纳抗性。质粒转化的条 件为电转化，应用于蛋白表达。适宜生长 温度是28至30度，温度超过32度对蛋白的 表达是有害的，并可能导致细胞的死亡。 可生长在YPD培养基中。此菌株是His营 养缺陷型菌株，在缺乏组氨酸SCminimal media中无法生长。SMD1163的配套载 体是含有His4基因的酵母表达载体，例如 pPIC9K, pPIC3.5K。此菌株能够生成乙 醇氧化酶，正常使用甲醇。
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文献和实验1基因被ARG4基因替代，虽然aox2和aox1有97％同源性，但aox2利用甲醇的能力远比aox1弱［9］，在甲醇培养基上表现为Muts，其转化子也是Muts，表型不必鉴定。SMD1168为蛋白酶缺陷型菌株，特别适用于分泌表达载体，可避免表达外源蛋白被宿主菌同时表达的蛋白酶所降解，其它蛋白酶缺陷型主要还有SMD1165和SMD1163［10］。MC1003的aox基因全部删除，不能利用甲醇，即表型为Mut－His－。 1.2表达载体 P.pastoris没有稳定的附加
降解现象的原因就在于此。改变培养基的PH值、加入适量的酵母提取物和蛋白胨或酪蛋白水解物，都能够提高外源蛋白的稳定性，而某些酶抑制剂如EDTA，虽然也能增加其稳定性，但却常会使一些原先并不明显的蛋白变得非常明显，影响其使用效果。 另外，使用蛋白酶缺陷株如SMD1163、SMD1165或SMD1168亦可避免产物降解的发生。虽然并不是每一种外源蛋白都会受内源性蛋白酶的影响，但在未知其有无降解可能的情况下可以考虑使用此种宿主菌。 在另外一种情况下，如果基因工程产物会影响宿主菌生长代谢
醇的培养基上生长。最近，人们新推出了一类蛋白酶缺失型菌株，如SMD1163(his4 pep4 prb1)、SMD1165(his4 prb1)和SMD1168(his4 pep4)，解决了降解所造成的表达产物不均一性问题。但是，蛋白酶缺失型菌株生长缓慢，导致外源蛋白质产量上不去。 巴斯德毕赤酵母包括自我复制型游离载体和整合型载体，前者极不稳定，因此一般采用整合型载体。整合型载体含有一个启动子、相应的转录终止密码、筛选标记、抗生素抗性基因、在细菌中进行拷贝增殖所必需的序列以及3 ‘AOX1非编码区序列P
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