- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL4301
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冷藏
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5000U|10000U
THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶)
编号：KL4301规格：5000U|10000U
产品组成、储存、浓度：储存：－20 ℃保存。浓度：200 units/μl
制品说明：本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶THERMOscript Hˉ RTase。 同时经过多点突变，提高了反转录温度耐受性，可以在42-50℃进行反转录。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时更高的反转录温度大大的提高了GC含量高，二级结构丰富的RNA模板的反转录效率。
适用范围：第一链cDNA合成。可用于低拷贝基因的检测。
特点：合成cDNA片段长度最高可达12 kb。
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文献和实验依赖于RNA合成DNA的酶。也称为RNA依赖性DNA聚合酶。是含于病毒——致癌RNA病毒（Retrovirus）粒子中的一种酶，以单链RNA为模板，合成具有与此相辅的核苷酸序列的DNA。是1970年由H.M.Temin等和D.Baltimore各自独立发现的。通过此酶首先从病毒RNA合成RNA-DNA杂化物，再从这杂化物合成双链DNA。仅分解 RNA- DNA杂化物RNA部分的核糖核酸酶H活性存在于此酶上。开始认为此酶仅存在于RNA病毒中，但后来由未感染病毒的细胞和正常组织中也分离出同样
液的结果相当于或优于先用反转录缓冲液合成 CDNA，然后 PCR 缓冲液进行 PCR 扩增循环。当然，值得注意的是 PCR 缓冲液并不最适合第一条 DNA 链的合成。我们对不同的缓冲液用于大片段 DNA 合成是否成功还没有进行过严格的研究。 反转录酶的选择似乎对实验方法成功与否并不十分重要。BRL 和BOEHRINGERMANN HEIM 的 MULV 反转录酶进行全面的研究，但没有理由认为来源可靠的反转录酶不能适用 于该方法。在研究中，我们仅使用了PERKINELMER/CETUS 公司生产
糖凝胶电泳，若胶图上只有 28sRNA、18sRNA 和 5.8sRNA 三条单一的条带，说明提取的 RNA 完整度良好。如果出现拖带的现象，表示 RNA 部分降解。2、若胶孔和 28sRNA 条带之间出现单一明亮的条带，表示可能有基因组 DNA 残留。3、若胶孔内出现条带，说明可能有蛋白等大分子物质残留。逆转录RNA 提取完成后，需要反转成 cDNA 才能进行后续实验，所以反转步骤是必不可少的。逆转录将从逆转录酶的选择和引物的选择进行介绍：逆转录酶的选择：常见代表性反转录酶有 AMV RTase 和 MMLV
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