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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Instant HiFi PCR Mix
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1.5 mL/9 mL
本产品是即用型的高保真PCR试剂盒,含有除引物、模板以外的所有高保真 PCR试剂,包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、上 样染料等,特别适合于高保真PCR反应。
1. 高保真:所含Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq 酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便, 简化了高保真PCR的准备工作。
3. 高保真PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。 由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
5. 可用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的高保真PCR产物可用 于平末端克隆。
即用型高保真PCR试剂盒使用及效果
将本产品与用户自备的模板和引物的混合物按1:1的比例混合后即可进行高保真 PCR反应(高保真PCR参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL电泳检查扩增 结果。
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝,请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时,DNA 聚合酶停顿,导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度,准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍,并且具有很高的产率。 Q
® DNA聚合酶用量更少,而产量更高。正是这些独特的优点,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。 超保真 ——克隆好帮手 如果你下一步打算克隆,那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。它的错配率极低,是高保真PCR的理想选择。利用改良的lacI方法检测,在HF缓冲液中,该酶的错配率为4x10-7。这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。需要提醒的是,Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR
物,也不用担心抑制不稳定,使用起来方便、高效。此外,由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液,缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用,一般的缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl,QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。 此外,热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒,在RT反应较低温度下,Taq酶没有活性,逆转录酶发挥活性;RT反应结束,高温灭活逆转
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