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- 文献和实验
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低温保存
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大量
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- CAS号:
4684-32-6
- 规格:
20mg
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文献和实验,比如heptafluorobutyric酸,0.1%磷酸, 稀He formic酸(5-6%, pH2-4), 10-100mM NH4HCO3, 醋酸钠/氨,TFA/TEA,磷酸钠或钾,异戊酚。这样许多不同组合可形成缓冲剂,但要注意一点:硅反相柱料不能长时间暴露于高pH,甚至微碱pH, 因为这样会破坏柱子。 纯化 SPPS提取的粗肽含许多副产物,早期的纯化方法包括离子交换,分溶和反溶注析, 更现代的方法是反相HPLC,一般于60残基或更少的肽很成功。 当反相HPLC失败时,可按合离子
后,残留物溶于乙酸,用1NHaHCO3,10% 枸橡酸和盐水洗剂,之后用无水Na2So4干燥,蒸发,产品可以重晶结或层析纯化。 这种方法避免了用碱,但仍有消旋和尿烷副产物,水平与经典相当。所以优势中于容易方便,但应注意,两种方法的详细比较,目前为重仍未有。 十一、HPLC分析和纯化 分析HPLC使用柱子和泵系统,可以经受传递高压,这样可以用极细的微粒(3-10μm)做填料。由此多肽要在几分钟内高度被分析。 HPLC分两类:离子交换和反相。 离子交换HPLC依靠多肽和固相间的直接电荷相互
,纯度为95~98%。包装为小瓶冻干粉。 除特别注明外,多肽净重包装, 例如,1mg瓶的β-amyloid 1-40精确含1mg的多肽。多肽净重由氨基酸分析得到的肽含量计算。例如, 一个多肽样品毛重5mg,氨基酸含量85%, 多肽净重为5mg×0.85=4.25mg。请注意, 多肽含量不是多肽纯度,与抗离子象乙酸盐和溶剂,特别是水结合量合成多肽的本身特性。多肽纯度可能达100%, 但合成品中多肽含量由氨基酸组成,硫水性, 和多肽对溶剂和离子的暴露决定,特别是在纯化过程中, 无论多肽如何纯,冻干粉多肽
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