- ￥168
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海
- 40729ES10
- 2025年10月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃干燥避光
- 保质期：
有效期2年
- 英文名：
Hoechst 33258
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- CAS号：
23491-45-4
- 规格：
10mg
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 外观 | 储存 | 价格（元） |
| 40729ES10 | Hoechst 33258 | 10 mg | 黄色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 180.00 |
| 40729ES76 | Hoechst 33258 | 500 mg | 黄色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 3189.00 |
| 40729ES80 | Hoechst 33258 | 1 g | 黄色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 5310.00 |
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10 μg/ml。
产品性质
| 中文名称（Chinese Synonym） | 二苯甲亚胺, 三氯化氢 2'-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑 |
| 英文名称（English Synonym） | 2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258 |
| 分子式（Molecular Formula） | C25H24N6O·3HCl |
| 分子量（Molecular Weight） | 533.88 |
| CAS号（CAS NO.） | 23491-45-4 |
| 荧光光谱（Fluorescence Spectral） | Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 荧光可用氙气灯，泵弧灯或者UV激光激发；可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。 |
| 纯度（Purity） | ≥95%（HPLC） |
| 结构（Structure） |  |
冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，有效期2年。
配制母液
Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10 mg/ml。因此可用无菌超纯水配制成1-5 mg/ml的储存液于4℃避光保存。使用时用PBS或者其他合适缓冲液将其稀释成0.5-10 μg/ml工作液。
【注】：Hoechst 33258溶于PBS或者其他缓冲液时会有沉淀产生，因此不能用上述缓冲液进行储存液的配制。
注意事项
1）Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2）荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3）为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备0.5-10 μg/ml Hoechst 33258染色液。
2. 固定的细胞或组织染色：
a）对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b）对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c）吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色：
a）细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100 μl染色液。
b）在 37℃培养细胞 10～20分钟。
c）用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长460 nm。
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Hoechst 33258染色1．原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光
Testing for Mycoplasma by Indirect DNA Stain (Hoechst 33258 stain)
Materials Media� pre-warmed to 37ºC (refer to the ECACC Cell Line Data Sheet for the correct medium) 70% ethanol in water (Prod. No. R8382 ) Methanol (Prod. No. 175 ) Acetic Acid Glacial (Prod. No. A6283 ) Hoechst 33258
性会受到很高的背景干扰。Hoechst 33258，一种二苯甲亚胺DNA结合物，在检测时会有比紫外激发更强的荧光产生，检测更灵敏。它在紫外区(350nm)附近被激发，发射波在蓝光区(450nm)，检测dsDNA的灵敏度是10ng/ml（见图 1）。 图 1 用Hoechst染料和紫外激发光对dsDNA定量分析，加2倍Hoechst染料工作液之前，用1倍的TNE对1 μg/ml的DNA做倍比
