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- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Gram+ Bacterial Plasmid DNAOUT
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50次
本试剂盒是用于革氏阳性细菌(G+ )质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。G+ 菌 体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快 速提取质粒DNA,套操作可以在30分钟之内完成。
使用本试剂盒可从1-5 mL过夜培养的菌液纯化得到高达20 μg的高纯度质粒 DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
1. 快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
2. 不需要预平衡离心吸附柱。
3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。
4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。
5. 产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。
6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。
革氏阳性细菌质粒DNAout使用及效果
将0.1-1.5 mL过夜培养的G+ 12000-15000 g室温离心1分钟后, 重悬于0.6 mL 溶G+ 菌液中,颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟。12000-15000 g室温离 心10分钟,小心弃上清。用和0.25 mL溶液A重悬沉淀,再与0.25 mL溶液B混匀, 再加入0.35 mL溶液C,混匀,室温静止2分钟,离心10分钟,将上清转移到DNA 纯化柱中,静置2分钟,离心1分钟,弃收集管中的废液,加入0.5 mL的通用洗柱 液,离心1分钟,弃废液,重复上一步1次。离心1分钟,甩干残留液体,将DNA纯 化柱置于新的1.5 mL离心管(自备)中,加入适量(30—100 μL)DNA洗脱液离 心即得质粒DNA。
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文献和实验2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒:MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒: MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout(动物DNA提取试剂盒):3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout(植物DNA提取试剂盒):3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒): 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒: 3673-10 10 次 90元
、 No102 、 No106 为浙江省台州第一医院内科患者痰标本分离的 Kpn 。经抑制剂增强的肉汤稀释法证实为阳性。 2. 细菌质粒 DNA 提取与 PCR 扩增:采用碱裂解法提取质粒 DNA 。根据 TEM-1D 编码基因序列设计的 TEM 引物序列为 5' -TTAGACGTCAGGTGGCACTT -3' ( 76 ~ 95 )和 5' -GGACCGGAGTTACCAATGCT -3' ( 1065 ~ 1084 ),由上海生物工程公司合成。 PCR 反应参数同前。设大肠
试管 (1 5 mm-1 50 mm)4支、 试管 架1个、培养皿(90mm)3套、接种环。 2、肉膏胨、淀粉琼脂培养基1瓶(约50 ml) 3、0.2%淀粉溶液1滴瓶、革氏碘液1滴瓶、10%--3%过氧化氢1滴瓶。
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