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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Glassbeads Column Fungal DNAOUT
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50次
真菌DNA提取是一个难题,一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结 构形态,二是因为其细胞壁一般都很厚,比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式 真菌DNAout的姊妹产品,它利用 法破碎细胞,主要用于从真菌孢子和液体培养的 真菌细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNAOUT采用液氮研磨法破碎细胞,适 用于从真菌菌丝体中提取其基因组DNA)。本产品具有下列特点:
1. 即开即用,提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学 破壁法重复性好,也不容易带入外源真菌DNA(注:文献报道蜗牛酶或破壁酶 中常常有外源真菌DNA污染,用于提取真菌DNA往往会造成污染)。
3. 本方法提取一个样品只需要10余分钟,方便、快速和高效。
4. 一次可以处理5 mL的过夜真菌培养物,所得的基因组DNA OD260/OD280 一般都在1.8左右,长度一般在20 Kb左右,每mL菌液的DNA产率一般在1-3 μg。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。
玻璃珠法柱式真菌DNAOUT使用及效果
离心收集1-5 mL过夜培养的真菌细胞,加入0.5 mL 溶液A和体积相当于0.5 mL的玻璃珠(大约0.5克),振荡器上以最高速度振荡10分钟,再加入0.5 mL溶液 B,震荡2分钟,2000 rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液C,上柱, 用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100 μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA 待用。
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文献和实验2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒:MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒: MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout(动物DNA提取试剂盒):3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout(植物DNA提取试剂盒):3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒): 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒: 3673-10 10 次 90元
柱式法 Minute TM 胞质胞核分离试剂盒操作方法:A. 悬浮细胞样品(包括植物,细菌,酵母和真菌制备的原生质体)1.500Xg,3 分钟低速离心收集细胞,用预冷的 PBS 清洗一次2. 将细胞转移到 1.5 ml 离心管中,3000 rpm 离心 1-5 分钟,弃去上清。3. 按表格 1 加入适量的胞浆提取缓冲液(请注意样品及裂解液的比例,以达到最佳效果), 涡旋大力震荡 15 秒, 冰上孵育 5 分钟, 混匀. 接转胞质胞核分离步骤。B. 贴壁细胞1. 贴壁细胞生长至融合度 90
分培养的细胞可 以置于细胞裂解液中,通过简单的涡旋震荡来匀浆;而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法,通常用液氮研磨。比如说细菌(特别是 革兰氏阳性菌)的细胞壁,就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收。酵母和革兰氏阳性菌通常还需要液氮研磨过程中加入玻璃微珠帮助破壁, 酵母提取也可以加入诸如Lyticase等破壁酶帮助破壁,再用TRIpure或RNApure进行提取。4.选择最好的RNA分离方法现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前最简单也是最安全的方法
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