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-20℃
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长期
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大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
500U|3000U
冷抑制热启动Taq DNA聚合酶
英文名:HotMaster Taq DNA Polymerase规格:500U|3000U
编号:KL229
储存:-20℃。
浓度: 5U/µl。
产品说明:
HotMaster Taq DNA polymerase 采用了国际上最新专利的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。PCR 产物3’端为A,可直接用TA 载体克隆。
产品特点:
1. 快速,不需要额外加热激活。
2. 持续退火时酶活性控制,达到全程热启动效果。
3.PCR 过程无变性抗体等蛋白污染。
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文献和实验对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时,有时会出现非特异性扩增,可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染,引物特异性如何,Mg2+浓度偏高等等,其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物,可以选择热启动酶重新实验,即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类:一类是化学法修饰的热启动酶,如 Ace Taq ,预变性 95℃5 - 10 min 即可
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用
Platinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用Taq Platinum,一般扩增长度可达4kb。 根据不同的实验目的选择最合适的酶, 克隆普通长度的目的DNA 片段:Taq、Taq Plus 保真度要求较高,片段比较短,如点突变、基因筛选等:Pfu、Taq Platinum 高保真长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等:Long Taq、Taq Plus 扩增基因组模板,需要降低背景:Hotstart Taq、Taq Platinum
下,活性被化学基团封闭,要在94-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应,避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增,提高了反应的灵敏度和特异性。 Long Taq:具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶,它不但扩增效率高而且错配率低,对于简单模板可扩增长达40kb的模板,对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。 Taq Platinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用Taq Platinum,一般扩增长度可达4kb。 不同实验
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