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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
DNA Erasol-2
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
15次
用Trizol等方法提取的细胞总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染 会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理 方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。开发的 非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快 速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
1. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子 完整性不会受到任何影响。
2. 本身不含RNase污染。
3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
6. 可以用于小RNA中DNA污染的清除。
非酶DNA清除剂使用及效果
将总RNA与本产品溶液A按1:1的比例混合后加1/2体积的自备氯,振荡后室温 离心1-3分钟,加两倍体积的溶液B,混匀后离心10分钟,用1 mL 75%的乙醇洗涤 沉淀一次后即得RNA沉淀。
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
PCR 酶数量如此之多,选择正确的酶可能是一项挑战。用于扩增 DNA 的各种酶的保真性、扩增速度和特异性各不相同。以下三个问题可以帮助您解答选择 PCR 酶时需要重点关注的因素。 Q 1:您需要确保序列准确性吗? 有时您只需要检测 PCR 产物或估算其大小,例如在对小鼠进行基因分型或筛选重组克隆时。对于这种类型的常规 PCR 分析,您应该使用标准的热稳定 DNA 聚合酶(如 Taq DNA 聚合酶)来确认目的 DNA 存在与否。 但是,如果要执行克隆实验或下一代测序(NGS),那么准确性至关
释放酶活;一类是抗体法修饰的热启动酶,如 Champagne Taq ,预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间,方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢?如果实验对保真度的需求不高,那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍,可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段,对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
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