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-20℃
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长期
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大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
1ml|5ml
2×HotMaster Taq PCR MasterMix(不含染料)
规格:1ml|5ml编号:KL251
储存:-20℃长期保存。
浓度: 0.1U/µl。
产品说明:
本产品包含HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。HotMaster Taq DNA polymerase 采用了国际上最新专利的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×HotMaster Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀。
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文献和实验bp 片段,以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序:同上 a 扩增程序同。 结果:Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1.大肠杆菌DNA扩增 模板:大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序: 循环数 Step 温度
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
PCR 酶数量如此之多,选择正确的酶可能是一项挑战。用于扩增 DNA 的各种酶的保真性、扩增速度和特异性各不相同。以下三个问题可以帮助您解答选择 PCR 酶时需要重点关注的因素。 Q 1:您需要确保序列准确性吗? 有时您只需要检测 PCR 产物或估算其大小,例如在对小鼠进行基因分型或筛选重组克隆时。对于这种类型的常规 PCR 分析,您应该使用标准的热稳定 DNA 聚合酶(如 Taq DNA 聚合酶)来确认目的 DNA 存在与否。 但是,如果要执行克隆实验或下一代测序(NGS),那么准确性至关
一、热启动 PCR 热启动 PCR 是除了好的引物设计之外,提高 PCR 特异性最重要的方法之一。尽管 Taq DNA 聚合酶的最佳延伸温度在 72℃,聚合酶在室温仍然有活性。因此,在进行 PCR 反应配制过程中,以及在热循环刚开始,保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。这些非特异性产物一旦形成,就会被有效扩增。在用于引物设计的位点因为遗传元件的定位而受限时,如 site-directed 突变、表达克隆或用于 DNA 工程的遗传元件的构建和操作,热启动 PCR 尤为有效。 限制
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