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T4 DNA聚合酶

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  • ¥190 - 1980
  • KALANG
  • 中国大陆
  • 2025年07月16日
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      长期

    • 英文名

      T4 DNA Polymerase

    • 库存

      大量

    • 供应商

      康朗生物

    • 规格

      50U

    T4 DNA聚合酶

    英文名:T4 DNA Polymerase
    本品是一种模板依赖的DNA聚合酶,可以在结合有引物的单链DNA 模板上,从5"→3"方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3"→5"外切酶活性,但不具有5"→3"外切酶活性。

    特点:T4 DNA Polymerase由于同时具有5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"DNA外切酶活性,可以用于将5"端突出末端补平或3"端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3"→5"DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高,即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3"→5"外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。

    用途:
    1)T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应;
    2)DNA 5"或3"突出末端的平滑化;
    3)通过置换反应进行标记DNA探针合成;
    4)定点突变过程中第二链的合成;
    5)不依赖于连接反应的PCR产物克隆。

    来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。

    活性定义:37℃30分钟时间内,催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

    活性检测条件:67mM Tris-HCl(pH8.8),6.7mM MgCl2,1mM DTT,16.7mM(NH4)2SO4,0.2mg/ml BSA,0.033mM of each dNTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。

    纯度:不含DNA内切酶,不含RNase。

    酶储存溶液:20mM potassium phosphate(pH7.5),200mM KCl,2mM DTT,and 50% glycerol。

    Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT,84mM (NH4)2SO4。

    缓冲液兼容性:在的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%,在1X B、1X G中的活性为75-100%。

    失活或抑制:70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。

    储存条件:-20℃

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