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-20℃
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长期
- 英文名:
T4 DNA Polymerase
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大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
50U
T4 DNA聚合酶
英文名:T4 DNA Polymerase本品是一种模板依赖的DNA聚合酶,可以在结合有引物的单链DNA 模板上,从5"→3"方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3"→5"外切酶活性,但不具有5"→3"外切酶活性。
特点:T4 DNA Polymerase由于同时具有5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"DNA外切酶活性,可以用于将5"端突出末端补平或3"端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3"→5"DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高,即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3"→5"外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。
用途:
1)T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应;
2)DNA 5"或3"突出末端的平滑化;
3)通过置换反应进行标记DNA探针合成;
4)定点突变过程中第二链的合成;
5)不依赖于连接反应的PCR产物克隆。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:37℃30分钟时间内,催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:67mM Tris-HCl(pH8.8),6.7mM MgCl2,1mM DTT,16.7mM(NH4)2SO4,0.2mg/ml BSA,0.033mM of each dNTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。
纯度:不含DNA内切酶,不含RNase。
酶储存溶液:20mM potassium phosphate(pH7.5),200mM KCl,2mM DTT,and 50% glycerol。
Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT,84mM (NH4)2SO4。
缓冲液兼容性:在的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%,在1X B、1X G中的活性为75-100%。
失活或抑制:70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。
储存条件:-20℃
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
7- 3D Assay in Matrigel : S1, T4-2, T4-2R
up pellet.? S1 cells 1.0 x 106 cells/1.2 ml matrigel T4-2. 0.7 x 106 cells/1.2 ml matrigel. T4-2 +AIIBII 0.7 x 106 cells/1.2 ml matrigel
作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3'→5'外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3'→5'外切
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