- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL193
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
SYBR Green qRT-PCR Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50μl×25次|50μl×50次
两步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒
英文名：SYBR Green qRT-PCR Kit编号：KL193
规格：50μl×25次|50μl×50次
产地：国产|进口
储存：-20℃
产品说明：
本产品由两个试剂盒组合而成。一个是反转录第一链耐热合成试剂盒1st Strand cDNA Synthesis Kit（PC44）,一个是2 x SYBR Green qPCR Mix（PC33）。首先由反转录第一链试剂盒合成cDNA，然后以cDNA做模板用2 x SYBR Green qPCR Mix进行荧光定量PCR扩增。
使用说明：请按照上述两个试剂盒详细步骤说明进行。
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文献和实验15sec，40个循环。实验结果 用小鼠肝脏组织RNA直接进行一步法荧光定量PCR；RNA经反转录成cDNA后分别用BioTeke试剂和T公司试剂同时进行两步法荧光定量PCR结果如图1。 两公司试剂同时在小鼠肝脏组织通过两步法荧光定量PCR试剂扩增和山大实验室所提供cDNA及引物扩增结果如图2。扩增的小鼠肝脏样品熔解曲线较差，而山东大学实验室所提供的cDNA和引物进行的扩增则完好。原因为由于长途携带引物和cDNA，保护措施不佳，造成引物和cDNA部分降解。 小鼠肝脏组织RNA经提取后直接
-Adaptor Primer 适用于具有 Poly(A)+ tail 的 RNA。 注： 原核生物的 RNA、真核生物的 rRNA 及 tRNA (某些种类真核生物的 mRNA)不具有Poly(A) tail.本 Primer 设计巧妙，反转录效率高。反转录反应后，用 M13 Primer M4 可进行 3'-RACE。 一步法和两步法 一步法： 利用同一缓冲液，在同一体系中加入逆转录酶、引物、Taq 酶、4 种 dNTP 直接进行 mRNA 反转录与 PCR 扩增。发现 Taq 酶不仅具有 DNA
，一个样本建议至少做 3 个技术型重复；5、模板为 cDNA 时，建议稀释 5 - 10 倍，减少反转录体系对 qPCR 实验的抑制作用，模板量最好进行梯度摸索，使 CT 值落在 20 - 30 之间最佳；6、确定所需的反应数量，在反应数量的基础上增加 5 - 10%，计算体积配置数量；7、体系配制采用能预混则预混原则，混匀后离心并保证无气泡；8、尽量选择进口且配套的耗材，如 ABI 仪器最好使用 ABI 封板膜，伯乐仪器使用配套的白色陶瓷板子。反应条件的设定：不同的荧光定量酶可能反应条件不一
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