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KAPA血液直接PCR试剂盒

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  • KAPA
  • KK7002~KK7003
  • 美国
  • 2025年07月16日
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    • 询价记录
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保质期：

      18-24月

    • 库存：

      大量

    • 供应商：

      KAPA

    • 保存条件：

      -20℃

    • 规格：

      见详述

    KAPA血液直接PCR试剂盒
    一、优点及用途
    KAPA血液PCR试剂盒包含KAPA血液DNA聚合酶，一种通过分子进化过程得到的新一代酶，是第一种专门为全血DNA直接扩增设计的DNA聚合酶。该试剂盒包括两个优化易用2倍浓度预混合物，包含除引物和模板（血液DNA)外全血PCR所需要的所以成分。使用KAPA血液PCR试剂盒，可直接从含有1-20%（v/v)全血的反应液中直接扩增DNA片段，而不需要前处理或DNA提取，大大降低了污染风险，缩短时间和节约支出。
    该款试剂盒包含：（1）Kapa Blood PCR Mix A（2）Kapa Blood PCR Mix B两种。其中Mix A主要用于高灵敏度荧光检测系统（PowerPlex 16 System(Promega)进行亲子鉴定、STR分型）；Mix B主要用于GC含量高的扩增体系，通过琼脂糖凝胶电泳和EB染色进行分析。二者的产物均适合限制性酶切、DNA测序、dHPLC分析。
    优点：
    （1）从新鲜血液、4℃保存2年以上EDTA抗凝的全血、EDTA抗凝剂血，FTA ® Elute卡、Whatman903样品收集纸（“Guthrie卡”）或常规滤纸收集的血液中直接扩增DNA;
    (2)无需DNA提取，降低污染风险，缩短时间与节约成本；
    （3）与现有的操作流程、实验步骤、常规检测手段兼容。

    图1. 用KAPA Blood PCR Mix B 从人类DDM基因（Duchenne muscular dystrophy）19外显子上克隆一段459bp的基因。反应体系为50µl，第1-6道：体积浓度为0-20%v/v，EDTA抗凝，-4℃保存的全血；第7道：FTA ® Elute卡；第8道：Guthrie卡；第9-10道：10ng和1ng人基因组做模板，MixB扩增；第11-12道：其他Taq酶扩增。反应条件：变性5min，延伸1min，35个循环。

    图2. KAPA Blood Mix A 得到的亲子鉴定结果（PowerPle×16,promega）。模板为用Guthrie卡收集的血。多重PCR扩增，反应体系为三色荧光，16个基因座（15STR和1个amelogenin）。反应条件为promega公司设定的条件。离心收集上层产物，用荧光毛细管电泳法进行检测。

    图3. 用该试剂盒扩增“遗传性血色病（HH）”。氨基酸突变体C282Y，个体纯合度>80%，主要HFE基因上由单核苷酸多态性（A845G）引起的。该SNP造成一个新的RsaI 限制性酶切位点。
    用KAPA blood Mix B 从10%v/v的EDTA血中扩增390bp片段。扩增的DNA离心，取上层产物直接用RsaI酶切。酶切产物2.5%TBE琼脂糖凝胶电泳，EB染色。
    左半部份为全血PCR产物：野生纯合型（WT）、突变型（M）、杂合型（Het）；右半部分为酶切后对应的结果。
    二、产品规格与价格
    产品名称
    货号
    规格
    价格
    Kapa Blood PCR Mix A
    KK7002
    500个反应
    电询
    Kapa Blood PCR Mix A
    KK7002
    1000个反应
    电询
    Kapa Blood PCR Mix B
    KK7003
    500个反应
    电询
    Kapa Blood PCR Mix B
    KK7003
    1000个反应
    电询
    三、应用范围
    用途：（1）人类、其他哺乳动物和鸟类基因分析；（2）GC含量<65%，扩增长度3.5kb；GC含量>65%，扩增长度1kb；（3）可用于常规检测：限制性酶切、琼脂糖凝胶电泳/EB染色、荧光毛细管电泳、DNA测序或dHPLC分析；（4）特别适用PowerPle×16 System(Promega)进行亲子鉴定；（5）SNP分析（限制性酶切）；（6）临床检验。

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