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- KALANG
- 中国大陆
- KL264
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
First strand RT-PCR premix for fluorescent quantitation
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
20μl×50次
荧光定量用第一链反转录预混合液
规格：20μl×50次英文名：First strand RT-PCR premix for fluorescent quantitation
编号：KL264
本品为一管式反转录预混Mix，5×RT MasterMix 中含有反转录第一链合所需的所有试剂（RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer），加入模板RNA 和RNase-Free H2O 即可进行反应。使得cDNA 的合成更加的方便快捷，特别适合cDNA 合成以后的两步法Real Time PCR 检测。
试剂盒组分：
5 ×RT MasterMix————————0.2ml
RNase free H2O—————————1ml
产品特点:
1.体系配制简单：本产品为预混Mix形式，只需加入模板RNA和水便可以进行反应。
2.反转录效率高：特殊优化的oligo dT和N6随机引物配比，反转录效率高。
3.反转录速度快：只需42℃，20 min即可完成cDNA第一链的合成。
4.通读复杂模板：能够用于GC含量高，二级结构复杂的RNA模板，合成cDNA*(代"片")段长度最高可达12 kb。
5.后续兼容性好：后续配合荧光定量检测产品，灵敏度高、稳定性好。
储存条件：-20℃，有效期一年。
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文献和实验PCR过程。（2）SYBR荧光染料法：该方法利用了SYBR Green荧光染料非特异性与双链DNA结合并发光的特性，检测PCR的全部进程，从而判定初始RNA的量。 常用的miRNA第一链合成方法成熟的miRNA大小只有22nt左右，在用实时荧光定量PCR检测miRNA时，难点在于如何识别如此小的miRNA并合成第一链。目前常用的用于识别并合成miRNA第一链的方法主要有颈环法和加尾法两种。（1）颈环法原理图（2）加尾法原理图由于成熟miRNA较小，无法用常规的方法直接进行反转录、PCR
利用了SYBRGreen荧光染料非特异性与双链DNA结合并发光的特性，检测PCR的全部进程，从而判定初始RNA的量。 常用的miRNA第一链合成方法 成熟的miRNA大小只有22 nt左右，在用实时荧光定量PCR检测miRNA时，难点在于如何识别如此小的miRNA并合成第一链。目前常用的用于识别并合成miRNA第一链的方法主要有颈环法和加尾法两种。 （1）颈环法原理图 （2）加尾法原理图 由于成熟miRNA较小，无法用常规的方法直接
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程，无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞，高效的保护RNA，又不会影响高效反转录反应，且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒（KR105，TIANGEN），一站式完成从细胞到cDNA的快速制备，同时去除基因组DNA残留，整个操作流程仅需50 min，获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样，冷冻保存供以后使用，是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择，并可实现高通量检测。 图
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