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M-MLV(RNase H-) 反转录酶

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  • ¥190 - 1980
  • KALANG
  • 中国大陆
  • 2025年07月14日
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      康朗生物

    • 规格

      2000U

    M-MLV(RNase H-) 反转录酶

    编号:KL104
    规格:2000U
    ● 产品简介:
    M-MLV反转录酶(RNase H-),是一种经过改造和优化的反转录酶。和普通的M-MLV反转录酶相比,缺失了Ribonuclease H (RNase H)酶活性,不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,可以合成长片段从DNA。
    本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。
    特点:M-MLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达9-13kb的cDNA。该反转录酶的最适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性,可以避免普通的M-MLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
    用途:M-MLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成。合成的cDNA第一条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。
    来源:该反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达
    活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at37℃. Enzyme activity is assayed in50 mMTris-HCl (pH 8.3),6 mMMgCl2,10 mMDTT,40 mMKCl,0.5 mMdTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP0.4 mMpolyA?oligo(dT)12-18.
    纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。
    酶储存溶液:50 mMTris, pH 8.3,100mMNaCl,1 mMEDTA,5 mMDTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
    5×RT buffer:250 mMTris, pH 8.3 at25℃,250 mMKCl,20 mMMgCl2,50 mMDTT。
    失活或抑制:70℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对该反转录酶(RNase H-)有抑制作用。

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