ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒北京厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒北京厂家在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒北京厂家
编号：SY0106
规格：1μg
品牌：百奥莱博
英文名：ARE luciferase reporter plasmid
ARE荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（ARE luciferase reporter plasimd）是用于检测ARE转录活性水平为目的的报告基因。ARE(antioxidant response element) 与Nrf2和NRF1转录因子结合，调节参与保护细胞免受氧化损伤的相关基因。

ARE报告基因主要应用于检测细胞的抗氧化水平或氧化应激状态、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMARE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ARE结合位点，可以高灵敏度地检测ARE的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得ARE报告基因更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMARE-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

想要了解更多关于ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒北京厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品：

·磷酸钙法细胞转染试剂
编号：SY0604
英文名称：Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
规格：200T
磷酸钙法转染DNA是基于形成磷酸钙-DNA沉淀的原理：磷酸钙可促使细胞膜和DNA的结合，之后通过细胞内吞的作用将外源DNA转入目的细胞。该方法曾被用于多种细胞系的转染。百奥莱博的磷酸钙法细胞转染试剂是在传统磷酸钙法的基础上经过特别优化，不仅在转染效率有了较大提高，且降低了细胞毒性，特别适合于293或293T细胞的转染，对其他大多数常见细胞如Hela、CHO也具有较好的转染效果，不仅适用于细胞的瞬时转染，且适用于稳转株的筛选。

产品组份：
CaCl2溶液————20ml
BBS溶液—————20ml

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）高纯度的质粒是获得高转染效率的必要条件，确保A260/A280＞1.8，且电泳检测抽提到的质粒90%以上都是超螺旋。
3）在用磷酸钙法转染细胞时应使用浓度不高于5%的CO2，CO2的最佳浓度为3%左右。
4）BBS溶液的pH值直接关系到转染效率，尽量避免把BBS溶液长时间暴露在空气中，以免被空气中的CO2酸化。
5）转染时由于质粒、细胞不同，最佳的质粒用量需自行摸索。

储存条件：-20℃，有效期一年

·SRF Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0141
英文名称：SRF Luciferase Reporter Plasmid
规格：1μg
SRF Luc荧光素酶报告基因质粒(SRF luciferase reporter plasmid)是用于检测SRF转录活性水平为目的的报告基因。SRF(Serum response factor)是转录因子MADS box超家族的一员，主要调控即早基因的激活(例如c-fos)，从而参与细胞的周期调控、生长和分化等。

SRF Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Serum Response信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMSRF-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个SRF结合位点，可以高灵敏度地检测SRF的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得SRF报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMSRF-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒北京厂家关键词：SY0106,ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒,ARE luciferase reporter plasmid


·基底膜基质胶基底胶(低生长因子)
编号：SY0465
英文名称：Matrigel, Reduced Growth Factor
规格：5ml
Matrigel基底膜/基质胶/基底胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出来的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包含生长因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵袭和基因表达等的研究。

Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、塞尔托利氏细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。Matrigel能影响成鼠肝脏细胞和人乳腺上皮细胞三维培养物的基因表达。同时，Matrigel可用作多种肿瘤细胞侵袭研究的基本支架，体内外血管新生研究必不可少的基质，以及体内动物模型移植瘤细胞生长的三维支架。Matrigel还能支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。

Matrigel, Reduced Growth Factor（Matrigel RGF）是低生长因子的基质胶，基于标准级别的基底膜/基质胶进一步纯化以去除其内所含的生长因子水平，包括EGF、IGF、FGF、TGF-β 等，其中TGF-β 由于偶联在胶原酶IV上和/或在纯化过程中与胶内的主要成分聚集在一起，浓度降低的相对比较少。本基质胶（低生长因子）适用于更广的细胞培养研究，包括2D/3D培养、血管生成、肿瘤细胞迁移和细胞侵袭、体内肿瘤模型建立等。特别适用于对基质成分更为严格的实验，如信号转导相关研究、阐释生长因子功能的研究或者基因表达研究等。本品为无菌制品，浓度为9-20mg/ml。

储存条件：-20℃，有效期六个月



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·免疫染色用一抗稀释液
编号：SY0776
英文名称：Primary Antibody Diluent for Imunostaining
规格：100ml
本产品可用于免疫染色时一抗工作液的稀释和配制，制备的一抗工作液可于4℃保存和使用至少6个月，且可反复多次使用，不仅节约了宝贵的抗体，又能节省时间，简化操作。

配制好的一抗工作液可直接用于相关免疫实验，如免疫细胞化学（ICC）或免疫组化实验（IHC）。

使用方法
根据一抗的使用说明书用本稀释液进行一定倍数的稀释，需同时考虑到目的抗原的表达量。一抗稀释后可直接用于免疫染色，染色结束后可回收稀释的一抗，4℃保存。【注意】为了提高抗体反复使用次数，建议在4℃进行一抗孵育。

注意事项
1)本一抗稀释液含有叠氮钠，因其会抑制过氧化物酶（HRP）活性，请不要用其对过HRP标记的一抗进行稀释。
2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：4℃，有效期一年。

·第一条链 cDNA合成试剂盒
编号：SY0290
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Kit
规格：50T
本试剂盒是基于Reverse Transcriptase，该酶热稳定性提高，在50℃的半衰期超过240min，且可长时间耐受高达55℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录，能稳定可靠地合成cDNA。且Reverse Transcriptase的独特设计，进一步增强了模板亲和力和行进性，使得全长cDNA的合成能力有了大幅度提升，可获得长达20 kb的cDNA，并且对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度，非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。

本试剂盒包含由总RNA或mRNA合成高质量第一条链cDNA所需的所有成分，并提供两种cDNA合成引物：Random hexamers和oligo（dT）18。合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR、qPCR以及PCR克隆。其中，5×RT Mix包含优化的缓冲体系和dNTP； Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase和RNase inhibitor。可根据需要，选择Oligo (dT)18、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。

试剂盒组分：

组份	规格
RNase free ddH2O	1 ml
5×RT Mix	200 μl
Enzyme Mix*	50 μl
Oligo dT18 (0.5 μg/μl)	50 μl
Random hexamers (N6)	50 μl
*包含RNase inhibitor，用于抵抗环境和体系中可能存在的痕量的RNase。

储存条件：-20℃，有效期一年。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。
功能检测1：以500 ng mouse total RNA为模板，Oligo dT18为引物，50℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增nebulin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的20.0 kb条带。
功能检测2：以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo dT18为引物，50℃反应30分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。
功能检测3：以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo dT18为引物，55℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测4：以1 pg-1 µg HeLa cell total RNA为模板，以Oligo dT18和Random hexamers为引物，测试qRT-PCR性能。

以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间。

客户需要准备的材料
1.RNase free的1.5 ml微量离心管或0.2ml PCR管
2.水浴锅或PCR仪
3.冰
4.RNA（高质量的完整的RNA对于获得高质量的cDNA是至关重要的。

引物选择
1） 如果模板为真核生物来源，建议选择Oligo dT18，其与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对，可获得最高产量的全长cDNA。
2）基因特异性引物 (GSP)的特异性最高。但有些情况下，用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成。这时，可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
3）Random hexamers特异性最低，所有RNA，包括mRNA、rRNA、tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高，或者模板为原核生物来源，使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时，可使用Random hexamers为引物。

应用实例

1 第一条链cDNA合成*（以20μl反应体系为例）
1）按照下表在RNase free离心管中配制如下混合液：

RNase free ddH2O	to 20 μl
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)	1 μl
or Random Primer	or 1 μl
or Gene Speicific Primers	or 2 pmol
5×RT Reaction Mix	4 μl
Enzyme Mix**	0.8-1μl
模板RNA	Total RNA: 50 ng-5 μg/mRNA: 5-500 ng

*可选步骤（一般不需要）：如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却 5min，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
** Enzyme Mix非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请瞬时离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可每次按照0.8μl使用，不会影响使用效果。

2）用移液枪轻轻吹打混匀。
3）如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，42℃孵育30-50min。
如用Random Primer，25℃孵育10 min，42℃孵育30-50 min。
4）65℃加热15 min(或者85℃加热5 min)失活Reverse Transcriptase。

2 RT-PCR
建议取1/10-1/5 体积(2-4 μl)的反转录产物作为PCR模板。
1）建议反应条件

Components	Volume	Final Concentration
cDNA Template	2 μl	as required
Forward Primer (10 μM)	1 μl	0.2 μM each
Reverse Primer (10 μM)	1 μl	0.2 μM each
10×Taq Buffer (含Mg2+)	5 μl	1×
2.5 mM dNTPs	4 μl	0.2 mM
Taq DNA Polymerase	0.5 μl	2.5 units
ddH2O to final volume	50 μl	Not applicable

注意事项
1）所有操作均应在冰上进行。
2）除使用RNase free的枪头和离心管外，RNA实验用的试剂建议专用，并在单独的洁净的区域操作。操作时，戴上口罩和一次性手套，避免说话。总RNA提取完成后，建议取少量跑1%琼脂糖凝胶电泳，检验RNA的完整性。
3）逆转录反应抑制物包括酚，盐，SDS，EDTA等。建议用75%乙醇 (用DEPC水配制)仔细洗涤RNA沉淀 (轻弹管底让沉淀悬浮，并静置数分钟)。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

我公司正在优惠促销报告基因检测等系列产品，期待您的咨询选购ARE-Luc荧光素酶报告基因质粒北京厂家。