PCR便携式冰盒

ELISA、WB、Q-PCR采样及取样注意事项

ELISA取样及运输注意事项 一、血清提取方法： 1.全血促凝管取血，轻轻颠倒两三次，放置片刻让全血凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。 2.全血普通EP管取血，室温放置2h左右，让其凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。 特别注意：取血清避免震荡，以防止溶血，溶血会对结果有影响。 二、样本取量及运输 每个指标做单孔检测，一个样本需取血清30ul，3个复孔需90 ul，冰盒-20度中短时运输（小鼠建议采取摘

【旧贴整理】花了2星期系统归纳关于PCR的各位老师旧帖,与大家分享 --PCR

理想。5、采用Hot start法或Cool start法，减少从室温上升到变性温度过程中引起的Primer非特异性Annealing。简易热启动的方法是加样时最好在冰上加，当然可以做个简易冰盒，直接在94度放入样本到机器，效果不错。6、Template量过多，Template量以20%递减。PCR模板是关键，引物可以优化。制备模板的时候，一定要注意核酸模板的纯度和量。纯度上要避免杂质和杂蛋白质的混入，同时还要注意添加模板的量，模板很理想的话，不用加太多，加的多了，混进去的杂质机会就多了

【转帖】聚合酶链式反应（PCR）

，以减少重复加样次数，避免污染机会。另外，PCR扩增试剂，PCR扩增反应液应与样品及PCR扩增产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一冰箱中。 (四)防止操作人员污染，使用一次性手套、枪头和PCR反应管。 (五)设立适当的阳性对照和阴性对照，阳性对照以能出现扩增条带的最低量的标准病原体核酸为宜，并注意交叉污染的可能性，每次反应都应有一管不加模板的试剂对照。 (六)减少PCR 循环次数，只要PCR扩增产物达到检测水平就可以停止反应。 (七)选择质量好的PCR反应管，以避免样本外溢及外来核酸的进