内质网蓝色荧光探针(活细胞)

活细胞荧光成像的 6 个技巧

1.选用适合您成像需求的显微镜 并非所有显微镜都同样适合活细胞成像。例如，倒置显微镜从样品下方成像，非常适合活细胞成像。这样可使物镜更靠近活体标本，而这对于大多数高数值孔径（NA）物镜来说是必需的要求。 2.使用盖玻片底培养皿 部分塑料底培养皿会增加自发荧光并降低信噪比（S/N）。在对背景要求较高的实验中，可优先选择成像级低自发荧光材料或盖玻片底培养皿。 3.使用透射率较高的荧光滤光片提高信噪比 荧光滤光片镜组及其内部的滤光片是活细胞荧光成像实验重要的硬件之一。 选用具有高透射率的滤光

热点聚焦丨活细胞「相分离」成像指南

被报道后，为神经、自噬、肿瘤、免疫等多领域机制研究开辟新思路，相关成果大量见于 CNS 期刊。活细胞成像与 FRAP 实验已成为验证胞内 LLPS 的核心证据。 2020 年 Science 上发表的一项研究中 Elaine Fuchs 团队借助转盘共聚焦，通过持续数分钟至 16 小时的延时成像，捕捉丝聚蛋白液滴融合过程，对比突变体相变动力学。诸多相分离研究均选用转盘共聚焦，源于相分离研究的多重严苛需求：相变事件瞬时发生，需要高时间分辨率；长时成像需控制光毒性以维持细胞活性；样本存在厚度，要求优异

短时间获得更长活细胞成像的 4 个技巧

实现活细胞成像自动化以及简化任务对于达到实验目标至关重要。这里介绍 4 个需要留意的技巧：   1. 让标本在温暖、稳定的环境中保持健康状态 活细胞成像过程中最大挑战之一就是如何在温暖舒适的培养箱之外确保样品健康并能够在显微镜下表现正常。 可以利用能够为细胞提供稳定温度、湿度和  CO 2  密度的显微镜专用载物台上式培养箱或封闭式培养箱确保您的标本环境尽可能适宜。 另外可以加热物镜，否则其作为寒冷的接触源可能会损害样品的健康。 注意，微孔板外围区域可能存在比中心区域更高的环境波动风险