Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法

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北京百奥莱博专业生产销售Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)大量库存促销，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)大量库存促销
产地：国产|进口
英文名：Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8
品牌：百奥莱博
编号：YT310
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。

试剂盒组分：
SOD检测缓冲液———————70ml
WST-8———————————800μl
酶溶液———————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
Cu/Zn-SOD抑制剂A——————500μl
Cu/Zn-SOD抑制剂B——————500μl

超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。

目前有多种SOD活性测定法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C其氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度值，对于SOD的检测灵敏度比较低，并且不太适合大批量样本的检测。

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。


基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO：xanthine oxidase。

WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时，最大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。

哺乳动物编码3种SOD。在大部分组织中，含量最高的是定位在细胞浆中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表达在线粒体中，并且Mn-SOD是可以被诱导表达的。Mn-SOD在某些情况下也可以定位在细胞浆中。有些组织或体液中会含有第三种SOD，extracellular SOD，简称EC-SOD。EC-SOD也是一种Cu/Zn-SOD，和编码细胞浆Cu/Zn-SOD的基因相似性很高，但有所不同。综上所述，细胞或组织内共有两类SOD，即铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。这两种SOD酶活性的总量就是总SOD的酶活性。当用Cu/Zn-SOD的抑制剂抑制其酶活性时测定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此时同时测定总的SOD酶活性，就可以计算出Cu/Zn-SOD的酶活性。

KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性，也被大量用于测定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有剧毒，并且对Cu/Zn-SOD的抑制百分比达不到很接近100%。

本试剂盒采用了一种无毒的两步双重抑制Cu/Zn-SOD的方法，在避免使用有毒药品的情况下同时确保了对于Cu/Zn-SOD的抑制百分比达到高度接近100%，即对于Cu/Zn-SOD的抑制效果显著优于KCN或NaCN。使对于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的测定更加安全和准确。

注意事项：
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
4. Cu/Zn-SOD抑制剂A对人体有刺激性，使用时请注意适当防护。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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·Alexa Fluor 555抗兔免疫荧光染色试剂盒
编号：YT105
英文名称：Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 555-Labeled Donkey Anti-Rabbit IgG
规格：>300次
本试剂盒含有Alexa Fluor 555标记的驴抗兔IgG(H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Alexa Fluor 555是一种常用的非常明亮的红色荧光探针。它比绝大部分常用的红色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。Alexa Fluor 555的荧光光谱和Cy3非常接近。Alexa Fluor 555的吸收峰555nm、发射峰565nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗兔Alexa Fluor 555———————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·STAT3凝胶迁移突变探针(10μM)
编号：YT257
英文名称：STAT3 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT3 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－STAT3的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

STAT3 consensus oligo的序列如下：
5"-GAT CCT TCT GGG AAT TCC TAG ATC-3"
3"-CTA GGA AGA CCC TTA AGG ATC TAG-5"

EMSA突变探针－STAT3中STAT3的公认的结合位点发生了突变，从而使STAT3无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和STAT3的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和STAT3的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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BL0630 明胶-琼脂糖凝胶4FF Gelatin Sepharose 4FF
PY04-026 40%尿素水 5ml/瓶×10 加入95ml尿素酶琼脂基础，用于尿素酶生化试验
ARB10098 人EB病毒IgM(EBv IgM)检测服务 Human epstein-barr virus igm,ebv igM ELISA KIT
ARB12834 小鼠支原体酶免分析 mpuse mycoplasma ELISA KIT
ARB12644 大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)elisa检测 Rat free prostate specific antigen,fpsa ELISA KIT
PY02-146 改良Camp-BAP琼脂基础 250克
CYB163043 羊抗大鼠IgG(全分子)-FITC
ZCSXQ02 鼠血清 500ml
黄嘌呤 Novobiocin Sodium Salt 69-89-6
黄原胶 4-Methoxyphenylacetic acid 11138-66-2
ARB10066 人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)Elisa定量检测 Human b-cell leukemia/lymphoma 3,bcl3 ELISA KIT
曲拉通x-405 Tetracycline HC1 92046-34-9
ARB11584 人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)尿液中含量检测 Human stromal cell derived factor 1β,sdf-1β ELISA KIT

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