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- 百奥莱博
- 北京
- YT202
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
AP2 Mutation Probe For EMSA(10μM)
- 库存：
935
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
30μl
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖AP2凝胶迁移突变探针(10μM) 凝胶迁移EMSA在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称：AP2凝胶迁移突变探针(10μM)
规格：30μl
编号：YT202
英文名：AP2 Mutation Probe For EMSA(10μM)
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－AP2的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。
EMSA突变探针－AP2的序列如下：
5"-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5"
EMSA突变探针－AP2中AP2的公认的结合位点发生了突变，从而使AP2无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和AP2的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和AP2的结合的条带不会被抑制。参考下图。
图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。
注意事项：避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
储存条件：-20℃，有效期一年。
关键词：AP2 Mutation Probe For EMSA(10μM),AP2凝胶迁移突变探针(10μM),YT202,10ΜM
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文献和实验凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针，当核酸探针与样本蛋白混合孵育时，样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物；这种复合
EMSA是一个比较复杂的试验技术,由于工作原因接触这个试验技术到现在也有三年多的时间了,做了大概也有几百次吧, 那倒理想的试验结果的同时也碰到了很多莫名的问题和结果,到现在为止还有没有解决的,找不到原因的一个问题,呵呵! 现和smalldonkey商量一下将我对这个实验技术的总结和一个心得写出来给大家分享,批评指正。EMSA实验技术作为一个经典的DNA/protein,RNA/protein的检测技术,不是很多简单的实验技术可以替代的! 比如曾经在我们这个论坛中有站友提到
凝胶迁移实验 以下问题是以Promega公司试剂盒为例。 [InstallDir_ChannelDir]mob/72360.shtml 1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验？ 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变
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