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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
4年
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
1g
溴化乙锭
规格:1g编号:KL0249
本品为粉末状EB,可配制成10mg/ml的储存液。用于电泳检测时,工作浓度为 0.5μg/ml。溴化乙锭,英文名Ethidium bromide,缩写EB,一种DNA嵌入剂,可插入DNA/RNA中,其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍,因此在低浓度(10μg/ml)染色后无需脱色,是分子生物学常用的一种核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶抑制剂。溴化乙锭已用于核酸的许多荧光分析,还可结合到单链 DNA(虽然强度不高)和三链 DNA 上。另外,EB可与吖啶橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。
使用方法
一、胶染法(电泳前染色)
1. 制胶时加入EB 核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml(每50mL 琼脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液)。
2. 按照常规方法进行电泳。
注意事项
1) 此方法比较节省染料,250 μL(10mg/ml)染料大约可以做100块 50mL的胶。
2) EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3) 胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
4) 在染料的存在下,线状双链DNA的迁移率减小了15%。
二、泡染法(电泳后染色)
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr (0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。
3. (可选)对于检测较小量DNA(<10ng),可将EB染色后的凝胶于水或1mM MgSO4 中室温脱色20min,从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。
储存条件:室温,避光,有效期4年。
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文献和实验EB(溴化乙锭)到底有多毒?随着每年各类化学物质进入市场,产生残留物的数量不断增加,健康和环境成为日益关注的问题。虽然许多实验中使用的化合物是有毒的,很多都是潜在的危险,但一些化学品没有适当的危险性分类,在日常实验中被广大科研工作者所忽略。什么是EB溴化乙锭?在研究数以千计的实验室残留性有毒物质,最值得一提的就是溴化乙锭(EB;3, 8-二氨基-5-乙基-6-phenylphenanthridinium甲基溴),该物质的潜在的毒性作用已被大众广泛的认知。EB属于核酸分子嵌入剂,通常
通用,尤其是在进行动态检查时。医琳师妹:我将我所作的方法与大家共享:吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡(acridine orange/ethidium bromide, AO/EB):(1)细胞爬片:在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片,接种细胞悬液,干预后,予95%乙醇固定15分钟,微干,然后准备荧光染色。将100mg/L溶于PBS的吖啶橙和100mg/L溶于PBS的溴化乙锭各5μl(临用前混合加入,加样量宜小,有时各2μl-5μl足够,量太大容易形成细胞凋亡的假阳性),在照相前混匀
随着每年各类化学物质进入市场,产生残留物的数量不断增加,健康和环境成为日益关注的问题。虽然许多实验中使用的化合物是有毒的,很多都是潜在的危险,但一些化学品没有适当的危险性分类,在日常实验中被广大科研工作者所忽略。 什么是EB溴化乙锭? 在研究数以千计的实验室残留性有毒物质,最值得一提的就是溴化乙锭(EB;3, 8-二氨基-5-乙基
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