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- KALANG
- 中国大陆
- KL046
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
10次
无内毒素高纯度质粒大量快速提取试剂盒
编号：KL046规格：10次
产品介绍：
本试剂盒采用改进SDS -碱裂解法裂解细胞，在高纯质粒大量提取试剂盒基础上添加了特制的内毒素清除剂，粗提物通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心，除去内毒素，然后离心，吸附柱内的玻璃纤维素膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从玻璃纤维素膜上洗脱。
产品特点：
• 纯度高：内毒素含量小于0.1 EU/μg，可直接用于转染。典型OD260/280比值在1.8左右。
• 产量高：100-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90%。正常操作下提取出的超螺旋DNA大于90%。
• 简便安全：无乙醇沉淀步骤，不需使用有毒的苯酚、氯等试剂。
• 重现性好：采用进口特制吸附膜，柱与柱间吸附量差异极小，克服国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
• 获得的质粒产量高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染等各种分子生物学实验。
适用范围：
用于大规模质粒制备(Max Preparations)。
产品储存：
• 首次使用请将试剂盒所带全部的R Nase A加入溶液P1(终浓度100μg/ml) 置于4°C保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会混杂有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
• 环境温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或析出沉淀，在37°C水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量泡沫。
• 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时旋紧盖子。
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文献和实验分析、蛋白质的体外翻译等均依赖于高纯度完整的RNA。 因此, 如何获得高质量的RNA是研究人员关注的问题。1987年Chomczynski等 ［1］ 建立了酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法（acid-guanidine-phenol-chloroform, AGPC）。该方法较以往的传统方法操作简单，无需特殊的设备，抽提时间缩短至4 h，因而得到广泛的应用。数家公司据此开发出RNA提取试剂盒 ［2，3］ 。使用试剂盒简单方便，但价格相对昂贵。为探索操作简便、经济实用、快速
经过严格检测和对比实验，北京艾德莱生物产品DN3101 小量全血基因组DNA快速提取试剂盒的产量和纯度完全符合客户最严苛的芯片应用级要求。日前开始给复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室大规模供货，供货量达到3000人次/月。姜博士三天提了1500个陈旧血。客户评价说该款试剂盒的质量和稳定性完全达到世界领先水平，可以应用于基因芯片的要求。客户针对大规模用量大的情况下，进一步优化流程，300uL新鲜血及冻融过陈旧血，血块 提取6-10ug的全基因组DNA， 批处理48个样板只需要20分钟 脱盐
，但是质粒DNA正确复性，仍留在上清溶液中。如何从上清液中回收DNA的方法有很多，有用苯酚/氯仿抽提的，有用乙醇沉淀的，有用核酸吸附吸附的，目的都是试图采用有效，快速的方式纯化质粒DNA。我们提供的试剂盒就是选用特异的核酸吸附材料，优化结合与洗脱条件得到高纯度质粒DNA，纯化的质粒DNA纯度和得率可以满足分子生物学实验的要求。 在提取质粒的过程中，质粒提取的得率和质量与很多因素有关，如宿主菌的种类和培养条件、细菌细胞的裂解、质粒拷贝数、质粒的稳定性、抗生素、吸附膜的吸附能力、提取操作的熟练
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