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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Fish tissue DNA Extraction Kit
- 库存:
724
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50次|100次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括鱼DNA提取试剂盒打折促销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:鱼DNA提取试剂盒打折促销
编号:ALH181
产地:国产|进口
英文名:Fish tissue DNA Extraction Kit
规格:50次|100次
本试剂盒采用独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒适用于快速提取各种鱼类、虾类、扇贝等组织基因组DNA。
试剂盒组份(100次):
裂解液SL————————————20ml
结合液CB————————————20ml
抑制物去除液IR—————————50ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
蛋白酶K————————————2×20mg
吸附柱AC————————————100个
收集管(2ml)——————————100个
注意事项:
洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH 大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl, 1mMEDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:第一次使用前请先在漂洗液WB 中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1. 切取不多于30mg 的组织材料,放入装有180μl 组织裂解液SL 的1.5ml 离心管中,涡旋振荡15 秒。
根据提取的组织不同,起始量也稍有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20mg。如果裂解困难,可先用液氮研磨。
2. 加入20μl 的蛋白酶K 溶液(20mg/ml),立刻涡旋振荡充分混匀。将裂解物放置在55℃水浴1-3 小时或者直到组织消化完全。
不同组织裂解时间不同,通常需0.5–2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全,虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次,每次振荡混匀15秒。
可选做步骤: 如果RNA 残留较多,需要去除RNA,可在完成步骤2 后加20μlRNase A(25mg/ml)溶液,振荡混匀,室温放置5-10 分钟。
3. 加入200μl 结合液CB,立刻涡旋振荡充分混匀,70℃放置10分钟。
4. 冷却后加100μl 异丙醇,充分颠倒或涡旋振荡充分混匀,此时可能出现絮状沉淀。
5. 将上一步混合物和可能的沉淀都加入一个吸附柱AC 中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm 离心60 秒,倒掉收集管中的废液。
如果有不溶组织物可能堵住枪头,可将枪头在吸水纸上轻蹭去除不溶物;如果吸上来的混合物少则可以将枪头和不溶物一起弃去,该做法是为了去除不溶物,以免堵塞离心柱。
上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。
6. 加入500μl 抑制物去除液IR,12000rpm 离心30 秒,弃废液。
7. 加入700μl 漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm 离心30秒,弃掉废液。
8. 加入500μl 漂洗液WB,12000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
9. 将吸附柱AC 放回空收集管中,13,000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱AC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB(洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好),室温放置3-5 分钟,12000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温放置2 分钟,12000rpm 离心1 分钟。
洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积不应少于50μl,体积过小降低DNA洗脱效率,减少DNA产量。
11. DNA可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:鱼类组织DNA提取试剂盒|虾DNA提取试剂盒|扇贝DNA提取试剂盒|鱼DNA提取试剂盒
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鱼DNA提取试剂盒打折促销关键词:虾DNA提取试剂盒,鱼类组织DNA提取试剂盒,扇贝DNA提取试剂盒,鱼DNA提取试剂盒
·长片段Taq PCR MasterMix
编号:ALH253
英文名称:2×Long Taq PCR MasterMix
规格:0.5ml|5ml
本品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高,二级结构丰富的片段扩增。
本品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
产品组分:
Long Taq DNA Polymerase—————————0.05units/μl
MgCl2——————————————————4mM
dNTPs(dATP, dCTP, dGTP,dTTP)———————0.4mM
质量控制:
经检测无外源核酸酶活性;PCR 方法检测无宿主残余DNA ;能有效地扩增人基因中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
储存条件:-20℃。
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