
实验技术培训
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- 2025年07月15日
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文献和实验一、实验原理果蝇(fruit fly)是双翅目(Diptera)昆虫,属果蝇属(genus Drosophila),约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。果蝇优点: 1. 饲养容易。在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长,繁殖。2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代,每个受精的雌蝇可产卵400~500个,因此在短时间内就可获得大量的子代,便于遗传学分析。3. 染色体数少。只有4对。4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰,是细胞
一、知识背景 1. 基因表达:DNA——RNA——Protein 单拷贝基因表达存在逐步放大机制,如一个蚕丝心蛋白基因——104 个丝心蛋白 mRNA(每个 mRNA 存活 4 d,可以合成 105 个丝心蛋白)——共合成 109 个丝心蛋白 。因此单拷贝基因的 mRNA 表达水平对于其功能水平的调控是非常重要的。 2. PCR 技术(Polymerase chain reaction): 即聚合酶链式反应。在模板、引物和四种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于 DNA 聚合酶的酶促反应,其特异
Novoprotein CUT&Tag 2.0原理与应用培训
为了克服ChIP-Seq的缺陷,近岸蛋白质开发了ChiTag酶和CUT&Tag技术。CUT&Tag是一种革命性的新技术,它不需要甲醛交联和免疫共沉淀,即可特异性的将目的蛋白附近的DNA片段直接连上接头并打断,进行高通量测序。该方法可一管式高通量应用,或在单细胞研究中使用。该方法使用了ChiTag酶,可以在打断基因组的同时加上接头,不需要繁琐的补平加A加接头,并且可在一天内完成从细胞到测序文库制备全流程。
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